目的：克隆多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis，Em)硫氧还蛋白过氧化物酶(Thioredoxin peroxidase，TPx)基因，构建原核表达重组质粒，诱导表达重组EmTPx蛋白，并对其免疫诊断价值进行初步评价。方法：从沙鼠中分离多房棘球绦虫原头蚴，提取虫体总RNA，根据EmTPx基因序列(Genbank No.AB071135)，应用Primerpremier5.0软件设计特异性引物，引物含有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点。采用逆转录(RT-PCR)的方法获取EmTPx的cDNA片段，重组至原核表达载体pET-28a，构建重组表达质粒pET-28a-EmTPx，转化大肠埃希菌BL21进行EmTPx的诱导表达，超声破碎菌体后通过镍琼脂糖亲和层析进行纯化。以此为抗原，通过皮下多点注射，免疫新西兰大白兔制备抗重组EmTPx蛋白(rEmTPx)的多抗血清。通过Westernblot对rEmTPx的免疫学特性进行鉴定。通过间接ELISA试验，检测经影像学诊断和手术确诊的泡型包虫病患者血清74份，健康人群血清24份，评价rEmTPx的免疫诊断价值。结果：提取多房棘球蚴总RNA，采用RT-PCR方法扩增其基因片段，获得目的片段大小约600bp。构建重组表达质粒pET28a-EmTPx并经酶切电泳检测，片段大小相符。将酶切鉴定正确的阳性克隆进行测序，EmTPx基因片段长度为582bp，序列正确。测序证实重组表达质粒pET-28a-EmTPx构建正确，表达的目的蛋白分子质量单位约为26ku，与理论值相符。Westernblot显示该蛋白可被兔抗rEmTPx多抗血清识别，以rEmTPx为抗原采用间接ELISA法检测AE患者血清，特异抗体的灵敏度为66.2%，特异性为87.5%。结论：成功构建了pET28a-EmTPx原核表达载体，表达蛋白具有Em原头蚴天然TPx的生物学功能表位，且具有一定的免疫学诊断价值，可作为AE血清学诊断的候选靶抗原。