【摘 要】
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牛卵母细胞体外成熟、孤雌激活及体外受精技术的研究对于胚胎体外生产与推广应用具有重要的意义。本文用乙醇(ethanol,EN)和离子霉素(Ionomycin,Ion)激活成熟卵母细胞并用Ca2
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牛卵母细胞体外成熟、孤雌激活及体外受精技术的研究对于胚胎体外生产与推广应用具有重要的意义。本文用乙醇(ethanol,EN)和离子霉素(Ionomycin,Ion)激活成熟卵母细胞并用Ca2+荧光探针Fluo-3/AM对卵母细胞内胞质游离Ca2+的空间分布进行了观察;以TCM199为基础培养基探讨了EGF在牛卵母细胞体外对细胞成熟率(In Vitro Maturation,IVM)和卵裂率的影响。结果表明:(1)用7%EN处理5 min后,用2 mmol/L 6-DMAP处理4 h激活效果最好,卵裂率和囊胚率最高;7μmol/L Ion处理5 min后,用2 mmol/L6-二甲氨基嘌呤(6-Dimethylaminopyridine,6-DMAP)处理4 h激活组的卵裂率最高,而10μmol/L Ion组的囊胚率最高。(2)添加50 ng/mL EGF的成熟培养液培养卵母细胞,其成熟率和卵裂率最高。(3)EGFR在卵母细胞、受精卵卵裂后的2-细胞、4-细胞、8-细胞、16-细胞期胚胎表面和孤雌激活卵卵裂后2-细胞、4-细胞、8-细胞、16-细胞期胚胎表面均有表达。
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