雌激素对大鼠脑缺血再灌注后脑屏障的作用及机制的实验研究

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jie_er
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目的:通过观察雌激素对大鼠脑缺血再灌注后BBB的通透性、occludin表达的影响,进一步探讨雌激素在脑缺血中的作用,为缺血性脑血管病的治疗开辟新的途径。 方法:随机将去势雌性大鼠分为假手术组、模型组、雌激素预处理组,后两组参照Zea Longa线栓法制作急性大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,选取缺血再灌后4h,24h,3d三个时间点作为观察点,对各个时间点脑水肿情况、Occludin蛋白表达、血脑屏障通透性改变进行考察分析,并选取24h和3d作BBB超微结构电镜观察,脑水肿改变情况采用脑含水量百分数测定;蛋白质表达采用western blot方法;血脑屏障通透性改变采用伊文思蓝比色法.统计学分析。 结果: (1)与假手术组比较,局灶性脑缺血再灌4h模型组大鼠脑组织含水量增加(P<0.05),随缺血再灌时间延长,脑组织含水量持续增加,至24h,达到高峰(P<0.01),与同时间点模型组比较,各治疗组大鼠含水量均有不同程度降低(P<0.05或P<0.01),以24h组降低最为显著(P<0.01)。 (2)与假手术组比较,局灶性脑缺血再灌4h模型组大鼠脑组织EB含量增加(P<0.05),随缺血时间延长,脑组织EB含量持续增加,至24h达到高峰(P<0.01),与同时间点模型组比较,各治疗组大鼠EB含量均有不同程度降低(P<0.05或P<0.01),以24h组降低最为显著(P<0.01)。 (3)电镜观察雌激素预处理组较模型组同时间点比较BBB TJ开放减轻,星形胶质细胞足突及毛细血管管周水肿较轻,以3d组显著。 (4)Western blot检测Occludin蛋白表达,发现模型组4h Occludin蛋白表达较假手术组减弱,但无显著性差异(P>0.05),24h组Occludin蛋白表达较假手术组减弱,有显著性差异(P<0.05),3d组Occludin蛋白表达进一步减弱,有明显差异(P<0.01),雌激素组4h Occludin蛋白表达较同时间点模型组比较无显著性差异(P>0.05),雌激素24h及3d组Occludin蛋白表达较同时间点模型组比较均升高,有显著性差异(P<0.05)。 结论: (1)局脑缺血大鼠动物血脑屏障超微结构可见紧密连接发生断裂,内皮细胞内小泡数量增加及星形胶质细胞足突肿胀,可能是大鼠局脑缺血时血管源性脑水肿的重要因素。 (2)大鼠局脑缺血,随缺血再灌时间延长,紧密连接相关蛋白occludin的表达明显下降,提示occludin在调节紧密连接通透性变化的过程中有重要作用。 (3)雌激素上调紧密连接occludin蛋白的表达,有可能是其维护血脑屏障完整性减轻脑水肿的机制之一。
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