Wy14643对缺氧/复氧损伤大鼠肝细胞的保护作用及机制的研究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangxiang62
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的过氧化物酶增殖体激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor, PPAR)-α是配体激活的核受体PPARs家族的三个亚型之一。Wy14643是PPAR-α选择性激动剂,其对重要脏器的保护作用可能与PPARα激动剂具有抗炎和抗氧化作用相关。在肝脏中,肝细胞大量表达PPAR-α,而肝枯否细胞不表达。我们前期研究表明,Wy14643对在体肝脏部分缺血/再灌注损伤有保护作用,但不同剂量Wy14643对原代肝细胞缺氧/复氧损伤的保护作用尚未报道,本文研究不同剂量Wy14643对原代大鼠肝细胞缺氧/复氧损伤的影响并初步探讨其机制。方法SD雄性大鼠50只,体重250-300g,通过两步灌流法取原代肝细胞。将分离培养的肝细胞按1×105/ml种于培养板中,每组6孔。随机分成6组:正常组(C)、缺氧复氧组(H/R)、DMSO组(D)、Wy14643(10、30、100umol/L)组。Wy14643组,缺氧/复氧前2小时将Wy14643加入培养液中,使培养液中Wy14643的终浓度调整为10、30、100umol/L。将肝细胞放入培养箱中,缺氧培养(37℃、95%N2-5%CO2)4小时,复氧培养(37℃、95%O -5%CO2)10小时诱导细胞损伤,然后分别收集肝细胞和细胞培养上清液,分别测定肝细胞培养上清液中谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)活性及肝细胞丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;肝细胞线粒体内谷胱甘肽(GSH)的含量;MTT法测定肝细胞的存活率;电子显微镜观察肝细胞的损伤;RT-PCR检测PPARαmRNA的表达。统计学处理:采用SPSS11.5软件进行统计学处理,计量资料以均数±标准差(±s)表示,组间比较采用单因素方差分析, P<0.05为差异有统计学意义。结果与C组相比较,H/R组的肝细胞培养上清液中ALT、AST,肝细胞内MDA明显增高(P<0.01),而肝细胞内SOD、GSH明显下降(P<0.01)。与H/R组比较,Wy14643各剂量处理组,肝细胞培养上清液中的ALT、AST活性明显降低,并且呈剂量依赖性(P<0.05);Wy14643 10umol/L组中,肝细胞内的SOD的活性和GSH的含量增强,而MDA的含量降低,但无统计学意义(P>0.05);Wy14643 30umol/L组中,肝细胞内的SOD、GSH的活性增强(P<0.05),而MDA的含量降低(P<0.05);Wy14643 100umol/L组中,肝细胞内的SOD、GSH的活性增强(P<0.01),而MDA的含量降低(P<0.01),差异显著。与C组相比,H/R组细胞活性降低,PPARαmRNA表达明显降低(P<0.01);与H/R组相比,Wy14643 10umol/L组、Wy14643 30umol/L组随着浓度的增加,PPARαmRNA表达和细胞活性升高(P<0.05或P<0.01);Wy14643 100umol/L组的细胞活性显著升高,PPAR-αmRNA表达明显升高,差异显著(P<0.01)。电镜可见:与C组相比,H/R组线粒体肿胀明显,膜破坏,有足肿和空泡变性,嵴破坏,粗面内质网较少,溶酶体和核糖体较少。与H/R组相比,Wy14643各剂量组的线粒体、粗面内质网、溶酶体和核糖体改变随剂量增加明显减轻。结论Wy14643对肝细胞缺氧/复氧损伤有保护作用,其机理可能是通过上调PPAR-α的表达,增强细胞抗抗氧化能力。
其他文献
目的:心脏手术是很强的应激反应过程,而体外循环(CPB)可诱发全身炎症反应(SIR),本课题主要探讨体外循环围术期血清E、NE与TNF-α、IL-6的关系,提示CAs对炎症的调控作用。方法
在中国,社会组织的产生和发展与政府职能转变息息相关。由于历史遗留问题以及我国“强国家、弱社会”的国情,社会组织能力提升所需的大部分资源还是靠政府提供,因此产生了社
系统科学是以整体论的方法研究复杂性系统的新兴学科,而制度经济学研究的对象制度、经济又恰是复杂系统,因此制度外部环境、变迁(演化)、突变、协同、学习等成为系统科学和制
缔约过失责任理论的创立,为债的体系提供了一个全新的视觉。判断当事人是否承担缔约过失责任,需要正确把握耶林学说之精神实质,更要赋予其符合时代特征之新内涵。为此,应当对
目前,射频电路存在广阔的市场,成为无线通信领域内研究的热点之一。本文正是在这种形式下,对射频接收机进行了深入的研究。 本课题来源于哈尔滨工程大学自动化学院的项目“区
目的:研究自体半腱肌腱保留重建兔前交叉韧带的治疗效果,旨在探讨膝关节前交叉韧带部分损伤的治疗方法,并提供相应组织学及生物力学依据。方法:取36只成年新西兰大白兔,将其
目的分析2007-2016年四川省宜宾市第二人民医院网报的梅毒患者的分布情况,为该地的梅毒防治提供科学依据。方法对2007-2016年四川省宜宾市第二人民医院在中国疾病预防信息系
应广大体育学者要求,以深入认识赫伊津哈的《人:游戏者》与体育学的关系,对该书体系性的把握,提炼出理解该书的切入点为主要任务,《体育与科学》编辑部于2019年1月23日举办了
随着社会经济的不断发展,国家对基础设施的建设投资力度不断加大,公路建设发展不断完善,便捷了人们的日常交通出行,使得公路建设发展取得了较大进展。当前公路工程管理还存在
目的通过双荧光素酶报告基因技术验证miR-31对大肿瘤抑制因子2(LATS2)的靶向调控作用,观察miR-31在心肌细胞肥大过程中的可能影响。方法运用Targetscan软件预测大鼠miR-31对L