目的：探讨三黄煎剂对MCF-7他莫昔芬耐药(MCF-7/tamR)细胞氧化应激水平、PI3K/AKT信号通路和凋亡的影响,并初步分析其内在相关性。方法：建立MCF-7/tamR细胞系,采用CCK-8法检测他莫昔芬对乳腺癌细胞MCF-7、 MCF-7/tamR增殖的影响,并检测耐药指数；同时检测三黄煎剂对MCF-7/tamR增殖的影响。免疫荧光法评价MCF-7、MCF-7/tamR及各给药组的ROS的水平；流式细胞仪检测各实验组细胞凋亡情况；Western Blot法检测三黄煎剂对MCF-7/tamR细胞凋亡相关蛋白表达对的影响,同时检测三黄煎剂对MCF-7/tamR细胞PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响。结果：成功构建了MCF-7/tamR细胞株,细胞形态上发生改变,且对他莫昔芬的抵抗能力得到了增强,其RJ指数为3.61±0.35(p<0.05),相较于野生型的MCF-7细胞系,ROS水平升高,MCF-7/tamR细胞株凋亡率由5.2%下降至3.98%,且Bcl-2活性上升,Bax/Bak比值降低,且PI3K/AKT通路明显激活,PTEN表达缺失。三黄煎剂对MCF-7/tamR细胞株有明显的抑制作用,IC50值为4.28±0.06mg·mL-1,三黄煎剂能够使MCF-7/tamR细胞株的凋亡率上升为6.46%和8.95%,同时能够下调MCF-7/tamR细胞的Bcl-2活性,上调Bax/Bak,。能够降低耐药细胞株的ROS水平,抑制PI3K/AKT信号通路,提高抑癌基因PTEN的表达。结论：三黄煎剂能够抑制乳腺癌MCF-7他莫昔芬耐药细胞株(MCF-7/tamR)的增殖,促进其凋亡,其机理可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路的活性,降低ROS水平产生作用。