【摘 要】
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目的:探讨不同浓度的蔓荆子黄素(Casticin)对破骨细胞分化及生长的影响,同时明确蔓荆子黄素对破骨细胞发挥作用的信号通路。为绝经后骨质疏松(PMOP)的治疗提供一种新的潜在药物。方法:首先,利用CCK 8细胞毒性实验明确蔓荆子黄素对RAW 264.7细胞的药物毒性范围,选择安全的药物浓度范围;利用不同浓度的蔓荆子黄素+RANKL培养RAW 264.7细胞,待对照组破骨细胞生成后,进行TRAP染
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目的:探讨不同浓度的蔓荆子黄素(Casticin)对破骨细胞分化及生长的影响,同时明确蔓荆子黄素对破骨细胞发挥作用的信号通路。为绝经后骨质疏松(PMOP)的治疗提供一种新的潜在药物。方法:首先,利用CCK 8细胞毒性实验明确蔓荆子黄素对RAW 264.7细胞的药物毒性范围,选择安全的药物浓度范围;利用不同浓度的蔓荆子黄素+RANKL培养RAW 264.7细胞,待对照组破骨细胞生成后,进行TRAP染色及肌动蛋白环染色实验分别探究蔓荆子黄素对破骨细胞数量及肌动蛋白环的影响;同时利用Western-blot及q-PCR技术分别检测破骨细胞的特异性蛋白及基因,进一步明确蔓荆子黄素对破骨细胞分化的影响;最后,高密度培养RAW 264.7细胞,利用Western-blot技术探索蔓荆子黄素对破骨细胞发挥作用的可能的信号通路。结果:1、蔓荆子黄素在浓度小于1μM时,对RAW 264.7细胞的活性无明显影响。2、蔓荆子黄素在0.50μM时对破骨细胞的数量面积有明显的抑制作用(P<0.05),差异有统计学差异;在0.50μM浓度时,对肌动蛋白环的生成亦有明显的抑制作用(P<0.05),差异有统计学差异。3、蔓荆子黄素在0.50μM时对破骨细胞的分化有明显的抑制作用,且主要影响破骨细胞的激活期及成熟期。4、蔓荆子黄素通过NF-κB/BCL-2信号通路抑制破骨细胞的生成。结论:在蔓荆子黄素药物安全范围以内,蔓荆子黄素能通过NF-κB/BCL-2信号通路抑制RAW 264.7细胞向破骨细胞的分化,因此蔓荆子黄素可作为一种潜在的抗绝经后骨质疏松的药物来进一步研究。
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