【摘 要】
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非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染引起的猪的高度接触传染性疾病,死亡率高达100%。ASF长期在非洲流行,近年来流行
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非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染引起的猪的高度接触传染性疾病,死亡率高达100%。ASF长期在非洲流行,近年来流行范围有逐渐扩大的趋势,目前已经蔓延至俄罗斯等邻国,使我国养猪业面临巨大威胁。ASF无任何疫苗用于防疫,因此建立快速、准确的诊断方法对于防止该病传入和扩散具有重要意义。p54是ASFV的重要结构蛋白,具有较强的免疫原性,因此常被用来检测抗原,同时用重组蛋白代替活病毒抗原增加了检测的安全性。本研究通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增ASFV p54基因,插入原核表达载体pET-30a,将重组质粒pET30a-P54转化BLR(DE3)大肠杆菌,用IPTG诱导重组蛋白表达。SDS-PAGE分析结果显示,表达的His-p54融合蛋白为预期的21kD,且为可溶性表达。用镍亲和层析柱纯化表达产物,得到了纯度较高的His-p54融合蛋白。用纯化的His-p54蛋白免疫BALB/c小鼠,采集脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA进行杂交瘤细胞阳性克隆筛选,用有限稀释法进行3次亚克隆,得到2株能稳定分泌p54蛋白单克隆抗体的细胞株。以重组p54蛋白为抗原,经Western-blot和间接免疫荧光试验检测证明,获得的单克隆抗体能与抗原特异性结合；用2株杂交瘤细胞制备腹水单抗,其ELISA抗体效价分别达216和213。
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摘要：随着新课程改革的进一步推进，英语作为最重要的信息载体之一，已成为人类生活各个领域中使用最广泛的语言。如何使课堂教学更有效果，如何将新课标的思想理念、方法手段运用到日常教学中，越来越成为每一位教师所关注的焦点。 关键词：主体作用 以人为本 多鼓励 作为教学一线老师，通过对英语新课程标准的不断学习以及对课堂教学的不断探索，我认为除重视对学生基础知识的夯实，技能、技巧和能力等方面的培养外，还应
本研究根据中兽医脏腑辨证和病因学说,针对断奶仔猪脾胃娇嫩容易受到寒、湿的侵袭和断奶肝郁而导致脾虚下泻的发病机理,建立了“抑木扶土,理气活血”的用药原则,研制了一种中
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用研磨抛光的方法制备了 Φ0 .1mm的 Pt微盘电极 (研磨微电极 )。用这种研磨微电极研究强碱性溶液中 Bi2 O3 的循环伏安行为时 ,通过 SEM形貌分析和 Bi元素 X射线能谱分析 ,
教育家崔峦老师曾经说过：“作为语文教师，一定要保持清醒的头脑，时刻牢记语文教学姓“语”，不管怎样创新，要体现语文教学的特点。课不能上得华而不实，甚至哗众取宠。改革的决心要大，但具体到每一节课，又要实事求是。”时代要求我们教师要提高语文教学的有效性，促进教学最优化。那么在具体的教学实践中我们应该养做呢？我做了以下尝试。 一、创设情境，激发学习兴趣，让学生体验到成功的快乐。 兴趣是最好的老师，学生
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