目的：　　 建立人乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM，获取纯化完整的肿瘤细胞线粒体，探讨位于耐药细胞线粒体上P 糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)的功能，为P-gp 介导的肿瘤耐药机制提供新的思路。　　 方法：　　 运用阿霉素大剂量冲击法，结合低剂量持续诱导人乳腺癌亲本细胞株MCF-7，获得其阿霉素耐药株MCF-7/ADM；MTT法检测该耐药细胞株对阿霉素、紫杉醇和顺铂的耐药性；运用蔗糖密度梯度离心法提取肿瘤细胞线粒体，并经电镜鉴定；运用Rho123染色，流式细胞仪检测两株细胞线粒体的荧光强度，比较加入P-gp 抑制剂环孢素A(CsA)前后各线粒体内Rho123 摄取和外排变化。　　 结果：　　 倒置显微镜观察，MCF-7/ADM细胞较MCF-7细胞形态发生明显变化，主要表现在细胞大小，细胞质和细胞核的显著变化；MTT 结果显示，MCF-7/ADM细胞阿霉素耐药指数(resistant index，RI)为65.12，且对紫杉醇和顺铂也产生一定程度的交叉耐药性；电镜结果显示，提取得到纯化且完整的人乳腺癌细胞线粒体；流式细胞术结果显示，MCF-7/ADM细胞线粒体内Rho123 摄取明显低于对照组MCF-7细胞线粒体(P<0.01)，而外排明显高于对照组(P<0.01)，加入CsA 后，MCF-7/ADM 线粒体内Rho123 摄取明显增加(P<0.01)，外排明显减少(P<0.01)，接近对照组MCF-7细胞线粒体水平，MCF-7细胞线粒体Rho123 摄取和外排均无明显变化(P>0.05)。　　 结论：　　 位于耐药细胞MCF-7/ADM 线粒体上的P-gp 具有功能活性，它将抗癌药物从线粒体中排出，降低药物在线粒体内聚集，可能通过保护线粒体DNA 免受抗癌药物损伤，并协助细胞膜上P-gp共同外排药物，在亚细胞水平介导细胞耐药的产生。