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目的：建立人脐血单个核细胞的体外培养系统，用HBV感染人脐血单个核细胞，了解HBV在人脐血单个核细胞内的复制、分泌过程，进而建立起人脐血单个核细胞作为HBV感染的细胞模型，为探讨和研究HBV宫内感染的分子机制及HBV垂直感染奠定基础。方法：在大理学院附属医院妇产科收集脐血，用EDTA做抗凝剂，采用Ficoll密度梯度离心法分离得到人脐血单个核细胞，苔盼蓝染色结果表明活细胞比率达到98%。将脐血单个核细胞用RPMI1640培养液按照1×106/ml的密度接种在24孔细胞培养板中，在37℃、5%的CO2培养箱内培养，倒置显微镜观察细胞形态学的动态变化。用病毒颗粒与脐血单个核细胞比约为100:1进行感染。在HBV感染人脐血单个核细胞后继续培养15d，每天采用酶联免疫法(ELSIA)对细胞培养上清液检测乙肝病毒五项指标(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)，运用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)技术对细胞培养上清液和细胞内的HBV DNA进行定量检测，确定HBV DNA感染的动态变化。结果：⑴脐血单个核细胞形态学的动态变化：脐血单个核细胞在培养15d内能维持正常的细胞形态与结构，绝大部分细胞悬浮生长，少量细胞贴壁生长。⑵ELSIA法检测培养细胞上清液中乙肝五项指标：培养细胞上清液在第1d，HBsAg表现为阳性，第2d转为阴性，随后细胞培养至第7～10d时，HBsAg再次出现阳性，之后又转为阴性，HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb在检测中，均出现阴性结果。⑶荧光定量PCR法检测HBV DNA：每天更换细胞培养液的细胞培养上清液中的HBV DNA第1d可以检出，第2～3d没有检测出，从第4天再次检测出，且HBV DNA的拷贝数逐渐升高，在第9d开始呈下降趋势，第13d已检测不出来，HBV DNA拷贝数的变化曲线接近呈倒“V”形；不更换细胞培养液的细胞培养上清液中的HBV DNA含量逐渐升高HBV DNA拷贝数的变化曲线呈“S”形；培养细胞中的HBV DNA在第1至第3d，细胞内并没有检测出HBV DNA，从第4d开始，可以检测得到HBV DNA，在第9d，细胞内HBV DNA的含量达到最大，随着细胞培养天数的增加，细胞内HBVDNA的含量逐渐降低。培养细胞中的HBV DNA的拷贝数变化曲线呈倒“V”形。结论：⑴建立了人脐血单个核细胞的体外培养系统；⑵人脐血单个核细胞可作为HBV感染的细胞模型；⑶FQ-PCR法比ELSIA法能更好的确认标本中HBV存在。