普鲁卡因对人低分化鼻咽癌细胞增殖、细胞周期的影响及其可能机制的研究

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鼻咽癌(NasopharyngealCarcinoma,NPC)是我国南方常见的恶性肿瘤,目前治疗以放疗辅以化疗等多种疗法为主,但尚有较高的复发和远处转移率。普鲁卡因(procaine,PCA)是一种沿用多年的安全的局麻药,近年研究显示PCA能够使因异常甲基化而失表达的抑癌基因去甲基化,致这些基因重新表达而抑制肿瘤细胞增殖。目前尚未见到有关普鲁卡因抑制鼻咽癌细胞增殖的报道。本研究以鼻咽癌细胞为研究对象,研究在体外条件下PCA对鼻咽癌细胞生长增殖、细胞周期的影响并初步探讨其可能的作用机制。 方法 体外培养的鼻咽癌细胞CNE-2Z分别加入不同浓度的PCA,并作用不同的时间。应用MTT法和流式细胞仪检测观察PCA对鼻咽癌细胞CNE-2Z的增殖抑制作用和细胞周期的影响,同时用RT-PCR分析PCA对p16和RASSF1AmRNA的表达影响。 结果: 1.PCA对鼻咽癌细胞生长增殖的影响 MTT显示PCA对细胞增殖的抑制作用具有明显的时间和剂量效应(n=12),三种浓度的PCA(1.0mmol/L、2.5mmol/L、7.5mmol/L)作用于细胞2d后,对细胞增殖的抑制率分别为(26.62±1.26)%(n=12,P<0.05),(52.23±1.88)%(n=12,P<0.05),(89.04±1.09)%(n=12,P<0.05),IC50为2.5mmol/L。 2.PCA对鼻咽癌细胞细胞周期的影响 FCM检测结果显示,2.5mmol/L药物作用2d的CNE-2Z主要表现为G1期阻滞,S、G2期细胞减少,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。 3.PCA对CNE-2Z细胞p16、RASSF1AmRNA的影响 半定量RT-PCR分析CNE-2Z细胞中目的基因p16、RASSF1AmRNA表达,结果表明2.5mmol/LPCA处理CNE-2Z细胞2d,p16mRNA表达变化不明显,RASSF1AmRNA表达增强(P<0.05)。 结论 PCA能够抑制NPC细胞增殖,其可能的机制之一是通过诱导RASSF1A表达上调使细胞产生G1期阻滞而抑制CNE-2Z增殖。
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