【摘 要】
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目的:白薇为萝藦科鹅绒藤属植物白薇Cynanchum atratum Bunge或蔓生白薇Cynanchum versicolor Bunge.的干燥根及根茎,广泛分布于亚洲,具有2000多年的使用历史,其清热凉血等功效在现代临床上仍然使用频率高、范围广,常用于治疗风寒感冒、胃肠炎、腹痛等多种疾病。目前关于白薇药材及同科属伪品鉴别没有完整详细的材料,两个基原种白薇、蔓生白薇的特点在《中国药典》中并
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目的:白薇为萝藦科鹅绒藤属植物白薇Cynanchum atratum Bunge或蔓生白薇Cynanchum versicolor Bunge.的干燥根及根茎,广泛分布于亚洲,具有2000多年的使用历史,其清热凉血等功效在现代临床上仍然使用频率高、范围广,常用于治疗风寒感冒、胃肠炎、腹痛等多种疾病。目前关于白薇药材及同科属伪品鉴别没有完整详细的材料,两个基原种白薇、蔓生白薇的特点在《中国药典》中并没有详细的区分描述,且没有白薇药材含量测定方法。本实验探究白薇药材及同科属伪品大理白前、合掌消、徐长卿、老瓜头、潮风草、竹灵消、柳叶白前之间的鉴别要点,摸索白薇药材含量测定方法,为白薇药材及同科属伪品鉴别提供系统、明确的参考,并补充白薇含量测定方法。方法:本实验以萝藦科鹅绒藤属植物白薇、蔓生白薇、大理白前、合掌消、徐长卿、老瓜头、潮风草、竹灵消、柳叶白前的根为实验材料,采用原植物形态特征、显微、TLC薄层分析、化学分析、紫外谱线组、分子等多种鉴别方法,对白薇及其伪品进行鉴别,总结鉴别要点;通过水分、灰分、浸出物测定,对收集样品品质进行评价;通过HPLC对白薇、蔓生白薇共有C21甾体皂苷成分白前苷C含量进行测定,确定白薇药材含量测定方法及白前苷C含量范围。结果:白薇药材现有栽培及野生采集两种获取途径,其中蔓生白薇以野生采集为主,通过茎、叶、花的比较,建立植物检索表,减少采收过程中造成的误采误收;进行根横切面、粉末两方面的显微鉴别,横切面主要观察外表皮是否脱落及增厚情况、内皮层增厚情况、木质部形状,粉末主要观察导管类型、草酸钙簇晶形状大小、根下皮细胞细胞壁弯曲情况等,建立显微特征检索表;白薇药材及其伪品化学组分区别较大,通过对TLC薄层染色、紫外照射,可以清晰对比对照品、供试品间在出点位置、颜色、分离程度上的差异;提供两种化学分析方法,分别为Liebermann-Burchard显色反应(L-B反应)、硅钨酸反应,L-B反应为常见皂苷类反应,硅钨酸反应常用于以生物碱为主的植物鉴别,其中硅钨酸反应产生的沉淀并不是单一的白色,不同植物反应产生的颜色各异,放置过夜可形成混悬液,颜色便于区分,离心后可清晰看出不同植物的沉淀具有不同颜色,其中硅钨酸反应可以轻易区分白薇药材的两个不同基原品种白薇、蔓生白薇,其沉淀颜色差异较大,分别为灰紫色、蓝色,可以对白薇及其伪品进行初分;紫外谱线组通过峰位、吸光度可以直观区分白薇及其伪品,通过一阶求导可以对不宜区分的细微区别进行扩大,白薇同科属植物在二氯甲烷提取液中的峰位及吸光度都比较接近,但通过一阶求导可将不明显的肩峰、小峰扩大,从而进行区分;确立ITS2、psb A-trn H共同使用且以二级结构为辅助的分子鉴别方法,通过T3P遗传距离分析、最大似然法(ML)聚类、ITS2二级结构比对等可以对白薇及其伪品进行区分;通过水分、灰分、酸不溶灰分、浸出物、白前苷C测定,确定白薇最优产地,确定白薇药材白前苷C含量测定方法为:精密称取10.0g样品,95%乙醇160mL索氏抽提3h,旋干后用正丁醇50mL振摇萃取3次,合并萃取液,旋干后10mL定容或5mL定容,流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~10 min,30→43%A;10~40 min,43→50%A),流速1 mL.min-1,检测波长210nm,柱温40℃,进样量10μL,白前苷C的含量范围为0.001~0.056%。白薇与蔓生白薇、栽培与野生含量存在差异。辽宁抚顺清源基地的白薇质量洁净度、浸出物含量仅排到第3,但其白前苷C含量最高。结论:采用原植物形态观察、显微鉴别、理化鉴别、分子鉴别等多种方法对白薇及其同科属伪品的鉴别要点进行总结分析,可以提供完备的白薇药材鉴别参考;采用HPLC对不同产地的白薇药材的两种基原植物根的提取物进行白前苷C的定量分析,为白薇药材提供品质评价方法;为白薇药材开展下一步研究及开发利用提供质量评价参考。
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