西洋参和人参根、茎、叶UPLC-ELSD指纹图谱及7种皂苷类成分同测技术的研究

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目的:西洋参(Panax quinquefolium L.)和人参(Panax ginseng C.A.Mey.)均系五加科属植物,同属我国传统名贵大宗药材。基于药材资源有效保护、开发及利用,越来越多的研究方向转向药材的其他部位皂苷类成分的研究。近年来,针对西洋参和人参物质基础、药理活性及作用机制等领域研究广泛,现己公认五加科属药材中皂苷类成分是其主要药理活性成分。本文拟建立西洋参和人参根、茎、叶不同部位的UPLC-ELSD指纹图谱及7种皂苷类成分同测及比较研究。方法:本文中对西洋参和人参根、茎、叶样品制备方法的筛选进行考察,确立了最佳制备方法。摸索优化指纹图谱及同测技术的色谱条件,并确立最佳分析条件为:Agilent ZORBAXSB-C18柱(4.6×50mm,1.8μm),柱温25℃,乙腈-水梯度洗脱,流速1.0mL/min; ELSD检测参数为:漂移管温度40℃,气体压力0.32MPa, Gain:7。此条件满足了西洋参和人参药材根、茎、叶指纹图谱研究及7种皂苷成分同测技术的方法学要求。结果:(1)西洋参根、茎、叶UPLC-ELSD指纹图谱分别以人参皂苷Rb1、Re、Rb3作为参照峰确定了8、6、10个共有峰,各占指纹图谱总峰面积的98.20%、96.39%、95.71%;吉林地产西洋参根、茎、叶指纹图谱相似度均大于0.90;聚类分析显示西洋参根按照生长年限可分为2年生和3年以上两类。(2)人参根、茎、叶UPLC-ELSD指纹图谱分别以人参皂苷Rb1、Re、Re作为参照峰确定了8、3、10个共有峰,各占指纹图谱总峰面积的94.93、96.06%、97.78%;吉林地产人参茎叶和3-7年生人参根指纹图谱相似度达到0.90以上;聚类分析显示人参根可根据生长年限分为2年生、3~5年生和6-7年生三类,人参茎按照产地吉林敦化产为一类,其他吉林产地为一类,人参叶按照产地可分为吉林长白、吉林靖宇和吉林集安三类。(3)以人参皂苷Rg1、Re、拟人参皂苷P-F11、Rb1、Rb2、Rb3和Rd等7种皂苷类成分为同测指标成分进行了西洋参和人参根、茎、叶不同部位含量测定和比较研究。研究结果显示:西洋参和人参药材根、茎、叶不同部位的皂苷类成分含量上有显著差别,其中含人参皂苷Rg1、Re较丰富的是叶类部位;拟人参皂苷P-F,1以西洋参叶中含量最高;人参皂苷Rb1主要分布根类部位;人参皂苷Rb2主要分布在叶类和人参根中;人参皂苷Rb3在西洋参叶中含量最高;人参皂苷Rd在根、茎、叶中广泛分布。结论:本文建立了西洋参和人参根、茎、叶UPLC-ELSD指纹图谱,并对相应药材的指纹图谱进行了相似度评价和聚类分析,同时还进行了上述两种药材根、茎、叶不同部位7种皂苷类成分的UPLC-ELSD同测及比较研究。本文研究结果将进一步完善西洋参和人参药材质量控制体系,为西洋参和人参珍贵药材资源的有效开发与综合利用,并对基于西洋参和人参药材及其富含皂苷成分的新药研发,提供有效详实的科学实验依据。
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