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[目的]通过乙醛酸SD大鼠肾脏草酸钙结石动物模型的建立,探索羟基枸橼酸对大鼠肾草酸钙结石的溶石作用和对肾功能的保护作用,为草酸钙结石的治疗和预防寻找有效的药物。[方法]1.将40只雄性SD大鼠随机分为A组(空白对照组)、B组(结石组)、C组(枸橼酸氢钾钠颗粒组)、D组(羟基枸橼酸组)四组,每组10只。2.动物实验建模方法及步骤 本次实验分为两个步骤完成,第一步SD大鼠肾脏草酸钙结石模型的建立,通过查阅文献以及前期我们的相关研究,其中B、C、D组均按照60mg/kg的浓度给予乙醛酸腹腔注射1ml,每周总共5次,持续4周,与此同时A组给与腹腔注射1ml去离子水,持续4周。第二步,C组利用灌胃每天按照1 g/kg的浓度给予枸橼酸氢钾颗粒2ml,D组同样利用灌胃每天按照1g/kg的浓度给予羟基枸橼酸2ml,A组和B组每天通过灌胃给予2ml的去离子水,持续4周。3.实验观测指标 对每组大鼠24h尿量、尿液草酸(Ox)浓度;以及血清中的尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、钠离子(Na+)、钾离子(K+)、钙离子(Ca2+)进行检测。以及对各组大鼠肾脏进行HE染色,在光学显微镜下观察大鼠肾小管管腔内的结晶情况以及扩张情况。对各组大鼠的肾脏组织进行RNA测序,并观察各组大鼠中circRNA,mRNA,lncRNA表达谱的改变情况。[结果]1.血液各项检测结果各组实验大鼠血清中肌酐(Cr)浓度值检测结果如下:D组与A组相比,D组血清肌酐(Cr)值高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组与B组相比,D组血清肌酐(Cr)值低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组与C组相比,D组血清肌酐(Cr)值低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠尿素氮(BUN)浓度检测如下:D组和A组相比,D组高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。D)组和B组相比,D组低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组和C组相比,D组低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠血清钠离子(Na+)、钾离子(K+)、钙离子(Ca+)差异无统计学意义(P>0.05)。2.各组大鼠24h 尿液各项指标检测结果各组实验大鼠24h尿量结果:D组与A组相比,D组尿量高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组与B组相比,D组尿量高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组与C组相比,D组尿量高于C组,差异无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠24h尿中草酸(ox)含量检测结果如下:D组和A组相比,D组尿液草酸(Ox)浓度高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组和B组比较,D组尿液草酸(Ox)浓度低于B组,差异有统计.学意义(P<0.05)。D组和C组比较,D组尿液草酸(Ox)浓度低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.各组大鼠病理切片HE染色结果和晶体评分结果A组(空白对照组)大鼠肾小管内无结晶,无扩张:B组(结石组)大鼠肾小管内可见连续成片的草酸钙结晶,肾小管管腔明显扩张;C组(枸橼酸氢钾颗粒组)大鼠肾小管内可见不连续的草酸钙晶体结晶,肾小管管腔有扩张;D组(羟基枸橼酸组)大鼠肾小管内可见极少的草酸钙晶体,肾小管管腔扩张程度较C组(枸橼酸氢钾颗粒组)轻微。4.大鼠肾脏RNA检测结果通过RNA-seq测序方法结果显示(选取fold-change(fc)≥2,校正后的p<0.05),mRNA测序结果:B组(结石组)和A(空白)组比较有230个差异基因有统计学意义,D组(羟基枸橼酸组)和B组(结石组)相比较有651个基因有统计学意义。lncRNAs测序结果:B组和A组相比较有305个基因有统计学意义,D组和B组相比较有748个基因有统计学意义。circRNAs测序结果:B组和A组相比较有49个基因有统计学意义,D组和B组相比较有78个基因有统计学意义。[结论]1.羟基枸橼酸能有效溶解SD大鼠肾内草酸钙结晶,其溶石作用强于枸橼酸氢钾钠颗粒(p<0.05)2.羟基枸橼酸能有效降低肾草酸钙结石大鼠尿液中草酸含量,其作用优于枸橼酸氢钾钠(p<0.05)3.羟基枸橼酸能有效降低肾草酸钙结石大鼠尿液中肌酐、尿素氮的含量,其作用优于枸橼酸氢钾钠(p<0.05)4.羟基枸橼酸能通过提高CAMK2G的表达和抑制PRKCD的表达,减少肾小管上皮细胞的损伤,在抑制或溶解结石方面起到一定的作用,具体机制需要更深层次的研究