多房棘球蚴病俗称泡球蚴病是由多房棘球绦虫的幼虫(多房棘球蚴、泡球蚴)寄生于人或动物肝脏所引起的一种人兽共患寄生虫病,它的成虫主要寄生于狐狸、狼和犬的小肠内。本病主要在北半球高纬度地区和冻土地带流行,但随着世界贸易和全球化进程的推进,该病有向南半球蔓延的趋势。它不仅能严重危害人体的健康,而且还是一个严重的社会经济问题。目前,对于该病的治疗主要是以手术切除为主,药物治疗为辅,但是由于泡球蚴呈肿瘤样无限浸润生长,手术切除后能发生转移,因此对泡球蚴病的预防成为流行区各级政府所优先关心的问题。研究多房棘球绦虫保护性抗原EM95的免疫保护作用对泡球蚴病疫苗研制与开发具有十分重要的意义。本研究以NCBI数据库Em95基因序列作为参考序列设计引物,以多房棘球蚴总RNA反转录产物为模板进行PCR扩增,获得Em95基因完整ORF序列,并对该序列进行了相关的生物信息学分析。结果表明,EM95蛋白的编码基因长471 bp,与参考序列的相似性为100%,由156个氨基酸残基组成,其上有2个N-糖基化位点,N端有一长为16个氨基酸的信号肽序列,C端有由23个氨基酸组成的跨膜区,属于分泌型糖蛋白。B细胞抗原表位分析表明,EM95有6个潜在的抗原表位,比EG95预测的抗原表位少一个。将全长的Em95基因和截去编码信号肽及跨膜区的Em95基因分别克隆到原核表达载体中并转化到大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用IPTG诱导使其表达。结果表明,全长的Em95基因以包涵体形式表达,而截去信号肽及跨膜区的Em95基因(t Em95)以可溶性蛋白形式表达。将纯化后的tEM95重组蛋白免疫BALB/c小鼠(雌性,6周龄),小鼠分为免疫组(首免50μg,以后减半,40只)、佐剂组(40只)和对照组(40只),三次免疫两周后腹腔接种多房棘球蚴原头蚴(100个/只)进行攻击感染,9周后对试验小鼠进行剖检,结果表明EM95重组蛋白对小鼠的保护率为27.58%,减蚴率为60.52%~67.38%。结论认为,EM95重组蛋白对继发性多房棘球蚴病具有一定的保护作用,能明显抑制多房棘球蚴的生长;本研究为多房棘球蚴病EM95重组抗原疫苗的研制和开发提供了理论依据。