目的：利用噬菌体抗体库技术构建了一个人源性单链可变区噬菌体抗体库，以Aβ<,1-40>为靶，利用固相亲和技术，筛选出一株对Aβ蛋白具有较高特异性及亲和力的人单链可变区基因抗体(anti-Aβ scFv)，并确定其在Aβ<,1-40>上的结合表位。 方法：老分离B淋巴细胞，提取其总RNA，经逆转录合成总cDNA。以PCR技术，利用特定的引物分别扩增出人抗体的重链和轻链可变区基因片段(V<,H>、V<,L>)；将抗原Aβ<,1-40>包被到96孔微滴定板中进行固相化；筛选到的噬菌体抗体经测序确定抗体片段的基因序列后，以克隆有该基因片段的pDAN5质粒为模板，经PCR扩增出目的基因片段，纯化后克隆入原核表达质粒pET28a(+)中，用化学方法转化入表达菌E．Coli BL21(DE3)菌株中，优化表达条件，表达后裂解菌体。SDS-PAGE及Western Blot鉴定；利用转基因小鼠脑组织中的淀粉样沉淀物对纯化的抗Aβ单链抗体进行免疫组织化学鉴定分析。 结论： 1．利用噬菌体抗体库技术，从AD病人外周血B淋巴细胞中扩增出全套的抗体可变区基因，首次成功构建了AD病人的单链噬菌体抗体库，库容量为1．5×10<6>。 2．以固相化抗原Aβ从构建好的噬菌体抗体库中筛选到抗Aβ的特异性噬菌体抗体，并成功在大肠杆菌诱导表达出有生物活性的特异性抗Ap单链抗体。 3．抗Aβ特异性单链抗体的研制成功为研究AD的病因和发病机制提供了一个有效的工具，也为进一步研究和开发．AD患者的早期诊断、治疗药物提供了一种新的可供选择的途径。对抗体在Aβ上结合表位的测定，对Aβ肽免疫学特性的进一步理解，及Aβ疫苗的设计具有重要意义。 4．噬菌体抗体库技术可以较简便、快捷地获得各种具有生物活性的基因工程抗体，具有良好的应用价值和发展前景。