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目的:一.研究喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell careinoma,LSCC)和非典型性增生组织中凋亡抑制蛋白Livin的表达及其与治疗的关系。二.研究凋亡抑制蛋白Livin在喉乳头状瘤(laryngeal papilloma,LP)组织中的表达及其与临床复发、恶变的关系。三.研究Livin蛋白和增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclearantigen,PCNA)在喉鳞癌组织中的表达和它们之间的关系及其临床意义。方法:一.采用免疫组织化学SP法检测42例喉鳞癌、28例非典型性增生组织和10例正常喉粘膜中Livin的表达,并结合疾病临床与病理分期及放化治疗关系进行比较分析。二.采用免疫组织化学SP法检测43例LP和10例正常喉粘膜中Livin的表达,分析其表达水平与LP复发和恶变之间的关系及其意义。三.应用半定量免疫组织化学SP法检测58例喉鳞癌和10例正常喉粘膜组织中Livin和增殖细胞核抗原的表达水平和二者表达的关系,并结合颈淋巴结转移与生存期关系进行比较分析。Livin判定标准为在400倍显微镜下计数10个随机视野,取平均值,分别记为:(-)阳性细胞数≤5%;(+)阳性细胞数5%~25%;(++)阳性细胞数>25%。PCNA采用标记指数LI,即记数1000个肿瘤细胞中阳性细胞所占的百分数进行判断。四.所有数据均采用SPSS 13.0统计分析软件进行统计学处理,样本之间率的比较使用x~2检验,Fisher精确概率,Spearman相关分析,多组等级资料的比较采用多个独立样本非参数检验。以P<0.05作为差异有统计学意义的检验标准。结果:一.Livin定位表达于喉鳞癌、乳头状瘤和非典型性增生细胞胞浆,为均匀棕黄色颗粒;正常喉上皮细胞无表达。二.喉鳞癌阳性表达率为72%(72/100),其表达与N分期、病理分级及放化治疗相关(P<0.05),与T分期无明显相关;喉乳头状瘤中Livin阳性表达率为18.60%(8/43);其表达率与临床复发次数及恶变趋势正相关;非典型性增生组织中阳性率为7.14%(2/28),而正常喉粘膜未检出阳性结果。三.喉鳞癌组织中平均PCNA标记指数(LI)为(70.47±15.39)%。Livin蛋白表达阳性的喉鳞癌细胞PCNA LI为(74.76±12.27)%,高于Livin蛋白表达阴性者(49.87±12.01)%;有颈淋巴结转移的喉鳞癌中Livin蛋白阳性率(97.22%)高于无颈淋巴结转移者(59.09%);生存期5年以上的Livin蛋白阳性表达率(70.37%,19/27)比生存期5年内者(93.55%,29/31)低。结论:一.Livin表达定位于喉肿瘤和非典型性增生细胞胞浆。二.Livin在喉癌、喉乳头状瘤、非典型性增生等多种增生性喉组织中表达。在喉鳞癌高表达,非典型性增生(重度)组织低表达,正常喉粘膜不表达,提示Livin可能作为喉鳞状上皮癌变的分子标志物,成为喉鳞癌早期诊断的检验指标和诱导凋亡治疗的新靶点。三.Livin表达与肿瘤细胞的分化、转移、复发和预后有关。Livin抑制凋亡的程度与肿瘤细胞的恶性度正相关,Livin的表达与喉癌的病理分级相关,病理分级越高,细胞分化程度越低,Livin阳性表达率越高,揭示Livin抑制细胞凋亡、促进细胞增生,在喉癌的发生与发展过程中起了重要作用;Livin蛋白能促进喉鳞癌颈淋巴结转移,表达阳性者预后较差。通过对喉肿瘤放、化疗后凋亡抑制蛋白Livin表达研究,发现放、化疗诱导肿瘤细胞凋亡的同时,肿瘤细胞自身反应性增加Livin基因的合成和表达以对抗凋亡,可能是临床上出现放、化疗不敏感、耐药和放疗耐受现象的原因之一;喉乳头状瘤Livin表达率与复发率及恶变率呈正相关,阳性表达Livin的乳头状瘤更易于复发和恶变,在多次复发和恶变的乳头状瘤中Livin表达明显增高,进一步印证了喉乳头状瘤向喉癌转化的内在联系。Livin可能成为乳头状瘤评价、预后的一个重要指标,辅助临床诊断治疗。四.通过对增殖细胞核抗原(PCNA)在喉鳞癌中的表达研究,发现Livin与PCNA表达呈正相关。PCNA作为一种常规肿瘤抗原标记,反映肿瘤细胞的代谢状态及肿瘤细胞的增殖活性,从而明确了Livin在抑制肿瘤细胞凋亡过程中的积极作用,提高了Livin作为判断肿瘤恶性度及预后的指标的可信度和可行性。五.该研究取材临床手术及活检标本,能充分反映临床上肿瘤组织分化的多样性,使结果更符合临床实际。研究结果提示,应用免疫组织化学方法检测Livin的表达有助于喉肿瘤和增生性组织的早期诊断和预后,方便、快捷,结果准确,具有临床实用和推广价值。