苹果多酚大孔树脂纯化工艺及抗氧化活性研究

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苹果,古称柰,又叫滔婆,酸甜可口,营养丰富,是老幼皆宜的水果之一。它的营养价值和医疗价值都很高,被越来越多的人称为“大夫第一药”。苹果是一种十分有益健康的食物,其中的主要活性物质苹果多酚更是成为近年来科研工作者的研究热点。本文采用乙醇溶液辅助超声提取法等方法提取苹果多酚。以苹果残次果为研究对象,分析苹果多酚的提取工艺,测定苹果多酚抗氧化指标,并采用大孔树脂对苹果多酚中表儿茶素、绿原酸及其他主要酚类成分进行分离纯化。本实验通过提取纯化方法、主要组成成分以及主要的生理活性这三方面对苹果多酚综述研究现状,这为苹果多酚的进一步的研究和利用提供了参考信息。通过静态吸附的方法,筛选合适的树脂型号。通过动态吸附的方法,优化树脂吸附不同多酚成分的比例。通过高效液相色谱方法,摸索液相色谱对苹果多酚的洗脱条件,并且最终确定了色谱柱选用C18色谱柱,确定了流动相选用甲醇和2mM磷酸水溶液,建立起了苹果中多酚类物质的HPLC检测方法。液相色谱的条件为2mM的磷酸水溶液和甲醇作为流动相,分梯度进行洗脱,柱温为40℃,最大吸收波长为280nm。苹果中多酚含量较多的是儿茶素、芦丁、绿原酸和阿魏酸;果皮中中性酚的含量都高于果肉和果核中中性酚的含量;但对酸性酚而言,果核中酸性酚的含量高于果皮和果肉中酸性酚的含量;苹果残次果乙醇提取液AB-8型号大孔树脂吸附和解吸中存在绿原酸,阿魏酸优势酚类;HPD-80型号大孔树脂吸附和解吸中存在儿茶素,阿魏酸优势酚类:HPD-100型号大孔树脂吸附和解吸中存在儿茶素,绿原酸,芦丁优势酚类;LKS-02型号大孔树脂吸附和解吸中存在儿茶素优势酚类;LX-36型号大孔树脂吸附和解吸中存在绿原酸优势酚类;大孔树脂组合的吸附和解吸中存在儿茶素,绿原酸,芦丁,槲皮素优势酚类:阿魏酸未检测出。本实验将HPD-80、LKS-02、LX-36三种大孔树脂按照串柱法进行等比例组合,并进行DPPH和ABTS自由基清除能力的抗氧化实验,初步达到纯化苹果多酚的目的,设计了优化苹果多酚工业化生产的条件。实验结果表明,三种型号的大孔树脂组合后对芦丁和槲皮素的吸附效果明显增强,但是阿魏酸的吸附受到一定的抑制,经过抗氧化活性实验,得知三种大孔树脂串柱法使得苹果多酚的抗氧化活性得到增强,增强效率约为22.2%。本实验对于苹果残次果及苹果加工废弃物中多酚类物质的提取和纯化提供了理论依据。
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