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胚胎植入前遗传学诊断(Preimplantation enetic diagnosis,PGD)是一种重要的、有效的产前诊断方式,主要用于分析受精之前的卵母细胞以及移植前的胚胎中已知基因序列,在胚胎移植之前把已知遗传物质异常的胚胎剔除,避免怀孕遗传疾病问题胚胎,降低新生儿患有遗传疾病的比率,有效地筛查和帮助潜在遗传突变问题患病夫妇产下健康婴儿。PGD因取材的不同分为:极体活检、卵裂球活检和囊胚活检。极体活检和卵裂球活检均存在效率或者安全问题。囊胚活检技术虽然已经在临床上被应用,但至今囊胚活检的安全性都没有得到较为全面、系统的评估,在这种技术帮助下诞生的婴儿缺乏对其健康状态的长期追踪。本论文为了评价囊胚活检对活检对象生长发育产生的影响,采用ICR小鼠为实验动物,实施过囊胚活检后产下的小鼠作为实验组(以下称PGD组),自然受孕分娩小鼠作为对照组。本实验室的早期研究中得到透明带切割、囊胚活检对胚胎及小鼠早起各项指标不造成影响。在小鼠到达老年后,对两组小鼠进行悬尾试验、糖水偏好实验、旷场实验、高架十字迷宫实验,分析是否老年小鼠存在罹患类神经退行性疾病的风险。取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏观察其形态大小,并对其称重。取小鼠大脑皮质组织固定做石蜡切片进行免疫组化染色,提取脑部组织RNA进行qRT-PCR,分析脑部神经发育标志基因是否存在表达差异。我们先前的实验结果已知透明带切割对胚胎发育到囊胚无影响;囊胚活检成功率高且对胚胎的着床率影响不显著;囊胚活检的后代出生后骨骼、被毛、四肢发育正常且生育能力与对照组无差异。本论文悬尾试验中PGD组与对照组小鼠静止绝望期时间差异不显著。蔗糖偏好实验中两组小鼠糖水偏好值间差异不显著且均高于65%,不存在快感缺失的表征。在旷场中15 min测试实验统计分析,PGD组与对照组移动平均速度(0.088±0.004 cm/s vs 0.093±0.008cm/s)、总路程(69.950±4.819 cm vs 79.532±9.285 cm)、在墙边停留时间(433.575±10.860 s vs 403.908±13.001 s)、墙角停留时间(319.300±17.363 s vs279.481±30.030 s)、外围停留时间是(745.746±13.511 s vs 661.183±57.100 s)、外围移动总距离(53.290±2.847 cm vs 51.921±6.632 cm)、中央移动距离(20.510±1.216 cm vs 22.891±2.387 cm)和中央停留时间是(152.588±17.903 s vs 208.000±37.011 s),两组之间均无显著差异(P>0.05)。在高价十字迷宫测试中,PGD组和对照组的小鼠在开臂活动时间占总时间百分比(28.01%vs 25.01%)、闭臂活动时间占总时间百分比(44.94%vs 48.52%)、开臂次数占总出入次数百分比(63.85%vs 58.08%)和进入闭臂次数占总出入次数百分比(36.15%vs 41.92%),均无显著差异。表明PGD组与对照组小鼠在自主活动能力、空间探索欲望和焦虑水平上无差异。囊胚活检小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏的解剖形态和重量未见异常。对PGD组和对照组小鼠的大脑皮质组织进行免疫组化染色、qRT-PCR分析和蛋白免疫印迹,结果显示PGD组Mbp、Prdx5、Uchl1表达水平与对照组间差异不显著,但是Snap-α表达下降。结论,从神经发育考虑,囊胚活检的安全性比卵裂球活检有明显改善,囊胚活检老年鼠的自然神经行为能力和诱导神经行为能力均未见异常。有关PGD鼠Snap-α表达水平下降的原因和影响尚需进一步研究。