脊神经交叉吻合重建大鼠直肠功能的研究

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目的探讨利用脊髓病损平面以上健存的神经根,与椎管内腰神经前后根分别交叉吻合,人工建立大鼠完整直肠反射通路,重建直肠生理反射弧的有效性。方法取3月龄雌性SD大鼠30只,体重250左右;右侧为实验侧,左侧为对照侧。将大鼠右侧L5脊神经近端于出椎间孔2mm处切断、右侧L6脊神经于平L5脊髓水平离断,分别分离出L5、L6前后根,行L5前后根近断端与L6前后根远断端对应吻合(L5VR-L6VR/L5DR-L6DR),建立同时具有感觉与运动传导通路的完整的人工直肠反射弧模型;左侧均不处理。术后12周,在L5节段平面以下截断脊髓建立大鼠完全性截瘫模型,分别进行HRP逆行神经示踪、脊髓后角CGRP检测及直肠内压测定、股四头肌湿重测定。结果21只大鼠存活至术后12周,11只大鼠成功分离出吻合的神经根,获得实验结果。截断脊髓前后,刺激L6后根吻合口远端,经新建的人工直肠反射弧引出的直肠内压分别为(19.2±1.33)cmH2O和(18.9±1.27)cmH2O,差异无统计学意义(P>0.05)。对照侧截瘫前刺激L6后根,直肠内压为(45.23±1.78)cmH2O,均大于实验侧截瘫前后(P <0.01)。免疫组化结果显示L5节段右侧脊髓后角可见棕褐色CGRP免疫阳性传人纤维终末,其后角阳性纤维IOD值接近正常对照侧,差异无统计学意义(t=1.05,P>0.05);并可见L5后根CGRP免疫阳性反应轴突粗细不等,穿越DREZ进入脊髓后角边缘层,在组织上可以证实交叉吻合后后根感觉通路可以通过吻合口远端的脊神经长入脊髓后角予以重建,也表明了在前后根同时交叉吻合的情况下(与我们前期的实验比较),后根感觉通路的修复不会受到前根损伤的影响。HRP逆行神经示踪证实实验侧通过轴突再生建立了新的神经通路,再生轴突轴浆运输功能恢复良好,证实该通路同时具有了感觉信号的传入和运动信号的输出。组织形态学观察显示大鼠行走步态良好,大鼠实验侧股四头肌平均重量为(0.702±0.058g),对照侧重量为(0.710±0.061g),t=1.01,p=0.233>0.05,差异无统计学意义,这充分证实L5神经根的切断对大白鼠后肢的功能影响不大,选择其作为供体神经是可行的。结论利用大鼠脊髓病变平面以上健存的神经根,与椎管内腰神经前后根分别对应吻合,可建立完整的人工直肠反射弧,为实现临床截瘫患者自主性排便提供实验室依据。
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