皮克林双乳液的结构响应性及其口服递送增效制剂的研究

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双乳液是一种将乳状液分散在另外的连续相中所形成的多层乳状液,因其具有独特的“两膜三相”分腔室结构,在作为口服递送系统方面具有独特的优势。本文以细菌纤维素粒子稳定双乳液外层油水界面,构建皮克林型双乳液,并设计诱导加速破乳条件对其结构参数对结构响应性的影响展开研究,揭示其稳定性机制及构效关系。基于所构建的双乳液体系,制备皮克林双乳液基益生菌口服递送制剂,研究其存储稳定性、消化稳定性以及结肠黏附效率,阐明皮克林双乳液递送体系对益生菌的保护性递送机制。制备皮克林双乳液基EGCG及番茄红素口服共递送制剂,研究共递送制剂对活性物降血脂效应的影响,阐明共递送体系对EGCG和番茄红素在降血脂方面的协同增效机制。主要研究内容及结论如下:以PGPR以及细菌纤维素(BC)胶体颗粒为双乳液内、外层界面稳定剂,调控制备工艺参数制备W1/O/W2型皮克林双乳液。优化获得乳液的最优配方是:PGPR浓度为2%、W1:O为3:7、W1/O:W2为1:1、BC粒子浓度为1%以及内水相海藻酸钠浓度为0.5%。基于该体系,调控油相体积分数(ψ)和BC粒子浓度,可控性构建皮克林双乳液。通过渗透压胁迫、加热、冻融、离心诱导乳液加速破乳并监测乳液处理前后层析系数、包封率、粒径及其结构演变情况,阐明ψ和BC浓度对双乳液结构响应性的影响。结果表明,层析指数和内水相包封率是对结构参数敏感的指标。在渗透压、加热、冻融处理下,相对于外层界面粒子,油相性质对双乳液结构响应性的影响更加显著。冻融处理下,相对于油相性质,外层界面粒子对双乳液结构响应性的影响更加显著。总体规律是ψ的增大和BC浓度的减小都不利于乳液的稳定。研究丰富了皮克林型双乳液的稳定性机制及构效关系理论,为商业化双乳液制剂的设计提供理论指导。基于皮克林W1/O/W2型双乳液对嗜酸乳杆菌(LA)进行保护性递送,并以游离LA为对照,评价其存储和消化稳定性以及结肠黏附效率。在长期存储实验末期(14 d,4℃)、酸性胁迫(2 h,p H 1.5)、碱性胁迫(5 d,p H 7.2)实验中,皮克林双乳液结构稳定性强,皮克林双乳液基LA制剂存活率均高于游离LA,且被包埋的LA表现出极强的耐酸性。模拟消化实验表明游离LA经消化2 h后已经完全失活,而84.24%被包埋的LA仍然具有活性,且经皮克林双乳液的程序性消化被释放到肠液中,此外被包埋的LA的结肠黏附效率(43.27±4.66%)提高了3倍。所构建的皮克林双乳液基益生菌制剂的存储、消化稳定性以及结肠黏附效率都显著提高,作为液态益生菌补充剂在食品工业中具有潜在的应用潜力。成功开发皮克林双乳液基EGCG和番茄红素共递送制剂,并对其协同降血脂作用进行了研究。基于乳液的层析系数和微观结构演变评价制剂的存储稳定性,存储稳定的强弱顺序为:皮克林双乳液基EGCG制剂(PDE-E)>皮克林双乳液基番茄红素和EGCG共递送制剂(PDE-E+L)>皮克林双乳液基番茄红素制剂(PDE-L)>皮克林双乳液(PDE)。研究采用高脂血症模型评价制剂的降血脂效应。结果表明PDE-E+L的长期干预抑制肾周脂肪增重的效果比EL更显著,在抑制肾周脂肪增重方面表现出协同增效效应。但PDE-E+L在抑制肝脏和附睾脂肪增重上未表现出协同增效作用。结合Western Blot和RT-q PCR技术考察制剂对脂质代谢相关酶及其基因表达的影响,结果表明,EL主要通过抑制HMG-Co R、ACAT、成脂基因PPARγ的表达以及提高AMPKα的磷酸化水平来改善高脂血症大鼠的脂质水平,而PDE-E+L还可以通过番茄红素的特殊代谢通路即激活LDL-R的活性促进脂质代谢。综上,在皮克林双乳液递送体系中,EGCG和番茄红素共同调节脂质代谢,发挥协同增效效应,研究为水溶性、油溶性活性物共递送制剂的开发提供创新剂型。
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