【摘 要】
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背景:miR-495-3p参与多种癌症细胞的增殖和迁移过程,且对癌症细胞功能发挥重要的调控作用。特殊的富含AT的结合蛋白-1(Special AT-rich binding protein-1,简称SATB1)是一种在胸腺的生长发育及T细胞的生长和分化进程中发挥重要作用的蛋白,其通过调节细胞周期、诱导细胞分化和抑制细胞凋亡等途径在肿瘤的增值、侵袭和转移过程中发挥重要作用。目的:本实验主要探究miR
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背景:miR-495-3p参与多种癌症细胞的增殖和迁移过程,且对癌症细胞功能发挥重要的调控作用。特殊的富含AT的结合蛋白-1(Special AT-rich binding protein-1,简称SATB1)是一种在胸腺的生长发育及T细胞的生长和分化进程中发挥重要作用的蛋白,其通过调节细胞周期、诱导细胞分化和抑制细胞凋亡等途径在肿瘤的增值、侵袭和转移过程中发挥重要作用。目的:本实验主要探究miR-495-3p与SATB1在正常肝脏细胞以及肝癌细胞内的表达差异;明确miR-495-3p能否通过调控SATB1蛋白的表达抑制肝癌细胞株SMMC-7721增殖和迁移能力。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测正常肝细胞系LO2和肝癌细胞株SMMC-7721内miR-495-3p、SATB1 mRNA表达水平。通过Western blot法检测正常肝细胞系LO2和肝癌细胞株SMMC-7721内SATB1蛋白表达差异。采用细胞转染技术上调肝癌细胞株SMMC-7721内miR-495-3p表达水平。通过MTT实验检测不同处理组肝癌细胞株SMMC-7721增殖能力改变;通过transwell实验检测不同处理组肝癌细胞株SMMC-7721迁移能力改变。采用细胞转染技术上调肝癌细胞株SMMC-7721内miR-495-3p表达水平。通过Western blot方法检测不同处理组肝癌细胞株SMMC-7721内SATB1蛋白和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9表达水平。采用细胞转染技术上调肝癌细胞株SMMC-7721内miR-495-3p表达水平,同时转染SATB1过表达质粒。通过Western blot方法检测不同处理组肝癌细胞株SMMC-7721内SATB1和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9表达水平。结果:1、肝癌细胞株SMMC-7721内miR-495-3p表达水平较正常肝脏细胞显著降低,而SATB1 mRNA及蛋白表达水平较正常肝脏细胞显著增加。2、上调细胞株SMMC-7721内miR-495-3p表达水平可以抑制肝癌细胞株SMMC-7721增殖和迁移能力。3、上调细胞株SMMC-7721内miR-495-3p表达水平可以显著下调SATB1和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9蛋白表达水平。4、上调细胞株SMMC-7721内miR-495-3p表达水平的同时过表达SATB1蛋白表达可以显著抑制miR-495-3p对于细胞迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9表达的调控作用。结论:1、miR-495-3p在肝癌细胞株SMMC-7721内低表达,而SATB1在肝癌细胞株SMMC-7721内高表达。2、miR-495-3p可以抑制肝癌细胞株SMMC-7721的细胞增殖和迁移能力,同时具有下调SATB1、MMP-2和MMP-9蛋白表达的作用。3、miR-495-3p可通过调控SATB1蛋白表达抑制肝癌细胞株SMMC-7721迁移。
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