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甲硝唑属于硝基咪唑类药物，在动物源性食品中的残留对人具有潜在致癌性，农业部规定在动物源性食品中的最大残留限量为零。本研究的目的是建立鱼的肌肉和皮肤组织、鸡蛋及牛奶中甲硝唑残留检测的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)，为制定动物源性食品中甲硝唑残留检测的农业行业标准奠定基础。鱼的肌肉、皮肤组织以乙腈提取，鸡蛋、牛奶样品用乙酸乙酯提取，提取液旋转蒸干。正己烷—乙酸乙酯(2+1)溶解残余物，二氧化硅固相萃取柱净化，洗脱液氮气吹干，流动相溶解，高效液相色谱分析测定。紫外检测波长325nm，固定相为C18色谱柱，流动相pH4.3醋酸缓冲液：乙腈(88+12，v／v)。该色谱条件下，甲硝唑标准溶液的最低检测限和最低定量限为0.01μg／mL。标准溶液浓度在0.01～100μg／mL范围内，与峰面积线性关系良好，R~2=1。标准溶液浓度为100.0、1.0、0.01μg／mL时，日内变异系数分别为1.5％、2.7％、5.8％，日间变异系数分别为2.5％、7.1％、9.4％。草鱼肌肉、皮肤组织和鸡蛋、牛奶中甲硝唑的最低检测限和最低定量限为1μg／kg。空白样品中甲硝唑添加浓度为1、2、4μg／kg时的回收率，草鱼肌肉分别为65.7％±7.4％、67.7％±6.4％、67.6％±4.9％；草鱼皮肤分别为65.4％±5.0％、66.5％±5.0％、68.2％±4.3％；鸡蛋中分别为68.8％±6.7％、72.4％±6.8％、78.3％±6.4％；牛奶分别为75.4％±8.7％、79.0％±7.0％、81.9％±5.2％。各样品的日内变异系数小于10％，日间变异系数小于15％。产蛋鸡混饲甲硝唑浓度为250mg／kg的饲料，连续饲喂一周，用该方法可检测到停药后14天内鸡蛋中甲硝唑及其代谢物的残留。测定结果以外标法定量，确定鸡蛋样品中残留量，利用最小二乘法统计处理，绘制残留消除曲线，计算弃蛋期为15天。本研究建立了鱼可食性组织和鸡蛋、牛奶中甲硝唑残留检测的高效液相色谱法，样品处理过程简单，检测灵敏度高，准确度和精密度均符合残留检测方法要求，适用于在国内兽药管理部门、食品卫生检验部门、内外贸易口岸等部门使用。