冬虫夏草无性繁殖研究及其产物对HepG2细胞凋亡的影响

被引量 : 0次 | 上传用户:shewe111
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
冬虫夏草十分珍贵,资源奇缺。为了开发冬虫夏草的替代品,本文开展了冬虫夏草无性型菌株的研究及其人工培植。通过野外调查掌握了冬虫夏草寄主昆虫的生物学特性。冬虫夏草寄主昆虫整个变态周期内呈幼虫、蛹、成虫、卵四种形态;幼虫常年土栖;独住,三龄以上有互咬的习性;植食性且食谱广泛;对温度敏感;各龄虫对虫草菌敏感,病虫害严重。通过人工模拟实验证实,幼虫以休眠状态在冻土层越冬,身体皱缩、发黄。通过病理切片、显微观察发现,虫草僵虫体内菌丝通过毛囊薄弱处成簇穿出体外,通过包裹身体周围的土壤而形成膜皮;有些皮肤毛囊增厚的僵虫没有膜皮,通过子囊孢子的单孢子培养,发现菌落早期形成穿透钉结构。甘肃天祝虫草海拔较低,体型较小,采用PCR及DNA测序的方法,对其分离株的rDNA ITS和5.8S RNA全序列进行分析,结果表明分离株与中国被毛孢相似性为98%以上。冬虫夏草菌生长速度极慢,实验研究发现,通过人工断裂菌丝增加菌丝生长点和浅层培养技术能极大地提高冬虫夏草无性型菌丝的产量,产业化生产的结果也对此结论做出了进一步证实。用结晶紫染色法检测细胞存活率结果表明,冬虫夏草菌丝液可以显著抑制HepG2细胞的生长,并呈浓度-效应关系;用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况并经流式细胞仪测定,结果表明冬虫夏草菌丝液可诱导HepG2细胞的凋亡,也呈浓度-效应关系。采用DHE荧光探针进行检测,冬虫夏草菌丝液确实可以诱导细胞产生ROS, ROS抑制剂NAC对冬虫夏草诱导细胞凋亡有明显的保护作用;采用蛋白免疫印迹法对HepG2细胞中的蛋白表达进行分析,随着浓度的增加,p-JNK的蛋白表达量明显上升,Bcl-2的表达量逐渐下降;揭示ROS的促凋亡作用可能与激活JNK通路和下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达有关,其相关性有待进一步研究。通过人工养殖对比试验表明,琼脂加水溶化凝固后,可代替土壤养殖冬虫夏草寄主幼虫,优势明显。冬虫夏草寄主幼虫染菌试验结果表明,自然情况下,冬虫夏草菌的感染形式为子囊孢子和分生孢子,感染途径为通过外伤和消化道,其中子囊孢子主要依靠外伤感染,分生孢子主要通过消化道感染。
其他文献
目的:研究麝香乌龙丸对佐剂性关节炎大鼠激素水平调节的影响,探讨麝香乌龙丸对类风湿性关节炎(RA)作用机制是否与调节激素水平有关。方法:建立佐剂性关节炎大鼠模型,麝香乌龙
产业发展是区域发展的重要基础,体育产业日益成为区域经济新的增长点。目前,福建体育产业处于快速发展的初级阶段,同时呈现出显著的区域化非均衡发展特征。相对而言,台湾运动休闲
精神卫生法的基本原则是指贯穿于全部精神卫生法之中,体现精神卫生立法的基本精神和根本价值,用以指导精神卫生法的制定和实施的基本法律准则。调整的对象的特殊性和所处发展
目的:探讨丝裂霉素C联合免疫调节剂灌注预防膀胱癌术后复发的临床疗效和安全性。方法:将收治的95例非肌层浸润性膀胱癌患者按照随机分层分组法分为观察组和对照组,对照组术后
目的:研究慢性牙周炎患者局部应用中药清热消炎固齿缓释剂的临床疗效。方法:随机选择慢性牙周炎患者90颗患牙配对分组,随机分为试验组30颗、阴性对照组30颗和阳性对照组30颗
<正> 现在,北京市正在研究城市空间发展战略,今后20年北京将发展成什么样,是这次战略发展要解决的主要问题,各方面分析了北京的现状,提出了许多对策与设想。到底应该用什么思
本文通过广泛阅读国内外有关工程项目的人力资源管理研究成果的文献,对其内涵,特征进行深刻的理解和阐述。首先文章对研究工程项目的人力资源管理的模式的意义和目标进行阐述。
生命科学史既是自古以来的科学研究史,也是科学家的思想发展史,它向我们展示了科学理论的发展趋势、科学家的探究历程、科研方法、科学家的生平、科学态度以及科学精神等,具
上升的离婚率一直是社会关注的热点问题,因离婚而出现的一系列社会问题也引起了人们的讨论,如何保障离婚家庭的儿童权益是其中一个重要问题。本篇文章以对贵州省离婚家庭儿童
推动当代中国马克思主义大众化要着眼于实践性、民族化和时代性这三个基本维度。实现马克思主义大众化应遵循立足实践发展、突出民族特色、展现时代精神的基本原则,通过变革