【摘 要】
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磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol,PI）是细胞膜中含量最少的一种磷脂。虽然含量少,但磷脂酰肌醇是细胞器特性、膜转运和细胞生长的关键决定因素。磷脂酰肌醇4激酶（PI4Ks）是磷脂酰肌醇信号通路的起始和关键分子。PI4Ks磷酸化PI肌醇环的D4位羟基,产生该信号通路中重要的底物—磷脂酰肌醇4-磷酸（PI4P）。在哺乳动物细胞中具有四种PI4K,包括两种Ⅱ型激酶（PI4KIIα和PI
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磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol,PI）是细胞膜中含量最少的一种磷脂。虽然含量少,但磷脂酰肌醇是细胞器特性、膜转运和细胞生长的关键决定因素。磷脂酰肌醇4激酶（PI4Ks）是磷脂酰肌醇信号通路的起始和关键分子。PI4Ks磷酸化PI肌醇环的D4位羟基,产生该信号通路中重要的底物—磷脂酰肌醇4-磷酸（PI4P）。在哺乳动物细胞中具有四种PI4K,包括两种Ⅱ型激酶（PI4KIIα和PI4KIIβ）和两种Ⅲ型激酶（PI4KⅢα和PI4KⅢβ）。本研究关注PI4KⅢβ,在文献中,也使用基因名PI4KB指代。PI4KⅢβ在许多细胞功能和致病过程中起着至关重要的作用。PI4KⅢβ主要位于细胞内的高尔基体和反面高尔基网络结构,参与正常高尔基体的形成和功能,在细胞分裂、维持溶酶体的特性和内质网-高尔基转运中发挥作用,并且介导反面高尔基网络结构（TGN）中囊泡的膜转运。近年来的研究发现PI4KⅢβ参与多种疾病的发生发展,如病毒、细菌感染、肿瘤和疟疾。PI4KⅢβ作为抗病毒治疗的潜在药物靶点的研究受到关注:正义单链RNA病毒劫持宿主PI4KⅢβ,形成富含PI4P的复制细胞器,以便其进行复制。PI4KⅢβ特异性抑制剂的研发正在进行中,并且取得了进展。然而,PI4KⅢβ在机体功能中的所扮演的角色尚不甚明了,并且该酶抑制剂作为抗病毒药物可能带来的毒副作用不明确。我们组前期的研究发现,PI4KⅢβ对VTA区多巴胺神经元兴奋性的调节起关键作用。目前,虽然已有研究发现PI4KⅢβ在大鼠脑中表现出相对较高的表达,但PI4KⅢβ在全脑的不同脑区/核团的详细表达情况还未见报道。本研究通过免疫荧光技术量化检测PI4KⅢβ在小鼠全脑不同脑区的表达情况,以及观察敲除PI4KⅢβ基因对小鼠行为的影响,从整体角度出发探讨PI4KⅢβ在体内的重要性。目的:探究PI4KⅢβ在小鼠全脑中的表达分布情况,以及其在小鼠行为中的重要性。方法:1.使用免疫荧光技术量化PI4KⅢβ在小鼠全脑的表达分布。2.制备PI4KⅢβ-Loxp小鼠,使之与CMV-Cre小鼠杂交,达到在小鼠全身敲除PI4KⅢβ的目的;利用基因鉴定和免疫荧光方法验证PI4KⅢβ的敲除效率。3.利用旷场、高架十字迷宫、悬尾测试、转棒测试、水迷宫等检测小鼠的自发活动、焦虑、抑郁、运动协调能力、记忆能力等行为。结果:1.PI4KⅢβ在小鼠脑中的表达具有选择性脑区分布,不同脑区表达分布丰度不同;PI4KⅢβ在海马、中脑的黑质和中脑腹侧被盖区、杏仁核、丘脑、下丘脑的一些核团有高丰度的表达。2.通过Lox P-Cre系统的基因敲除技术,将PI4KⅢβ-Lox P小鼠与CMV-Cre基因小鼠杂交,得到了杂合PI4KⅢβ+/-小鼠,但尚未得到完全敲除的纯合PI4KⅢβ-/-小鼠。3.旷场测试显示PI4KⅢβ+/-小鼠的自发活动增加,悬尾测试时不动时间减少,但在高架十字测试中无明显变化,运动协调能力和空间记忆能力没有改变。结论:PI4KⅢβ在小鼠脑组织中表达广泛表达但在海马、中脑的黑质和中脑腹侧被盖区、杏仁核、丘脑、下丘脑等表达丰度较高。PI4KⅢβ参与小鼠自发活动及悬尾测试中抗抑郁样行为的调控。
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第一部分基于血糖仪和DNA Walker的心肌肌钙蛋白I的便携式生物传感器目的:本研究旨在开发一种快速、便携的心脏标志物新型检测技术和策略,以便在早期医疗诊断、手术中检测以及流行病学调查等方面提供有力的技术支撑。方法:首先制备了探针复合物invertase-DNA,MB-walker和MB-TDNA-inve rtase。并分别选取尺寸排阻色谱（SEC）法,紫外分光光度计和SDS-PA GE电泳进
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目的:探讨6种大气污染物(PM2.5、PM10、SO2、NO2、CO、O3)长期暴露（1年）对石家庄市体检人群肾功能的影响。方法:采用横断面研究方式,对石家庄市三家体检中心2018年4月1日至2018年12月31日之间的体检人群进行问卷调查并获取体检资料。收集2017年4月至2018年12月间河北省生态环境厅发布的大气污染物数据以及监测站点经纬度坐标,采用经验贝叶斯克里金（Empirical Ba