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实验室前期研究发现了一株高产凝乳酶的B.subtilis(Bacil subtilis)YB-3菌株,其分泌的凝乳酶YS-1除对a-casein具有较强的蛋白水解活性外,对β-casein和K-casein也有较强的蛋白水解活性,相比之下,动物源的凝乳酶对β-casein几乎无水解作用。因此该凝乳酶不仅水解谱宽而且生产成本低,很有可能成为复方凝乳酶胶囊中动物源凝乳酶的替代品。基于上述原因,本论文开始从凝乳酶YS-1的发酵生产流程、提取纯化流程、凝乳酶YS-1制剂学研究和凝乳酶YS-1的复合凝乳酶胶囊对功能性消化不良的治疗效果等四个方面对凝乳酶YS-1的药学特性进行了研究,论文的主要研究内容和研究结果如下:1.论文分别从摇瓶培养和中试发酵培养两个方面研究了发酵参数对B.subtilisYB-3凝乳酶产量的影响,实验结果显示,在摇瓶培养阶段:种子的接种量为1.67%(v/v)时,发酵液的凝乳酶活力达到最大值85.41 SU/ml;高产凝乳酶的Bacillussubtilis YB-3为好氧微生物,充足的氧气条件对于提高产酶量具有重要作用,因此设定摇瓶培养的装液量为6%,此时菌体生长状况最好;6-14h为种子生长的对数期,因此设定中试发酵所需种子的种龄为12h。在中试发酵培养阶段,发酵过程中搅拌速度需设为600rpm,以保证菌体的正常生长及产酶;发酵1Oh时流加牛肉浸膏,可缓解发酵液内营养物质的缺乏,显著延缓了酶活力下降的速度;发酵过程宜在发酵1Oh后停止,此时发酵液内酶活力达到最大。2.论文通过离心去除发酵液菌体,将无菌发酵液经10 kDa中空纤维柱进行浓缩,浓缩倍数达到2.7倍,酶的收率为73%。上述浓缩液经20-60%乙醇分级沉淀后凝乳酶的纯化倍数达到2.05倍,比凝乳活性达到884.12SU/mg。之后,论文比较了常压干燥和真空干燥对沉淀溶解液的干燥效果,实验结果显示两种干燥处理方法的酶收率近似(86.60:89.97),而常压干燥较真空干燥法操作简单、成本更低,因此乙醇沉淀复溶液采用40℃直接常压干燥最终制成凝乳酶粉末。3.论文先对凝乳酶粉末的性状进行考察,发现其为淡黄色或灰色粉末,有微臭,在水中微溶,极具引湿性且每1g凝乳酶粉末的凝乳活力不低于80000 SU;论文以凝乳酶和胃蛋白酶为主药筛选淀粉、甘露醇等辅料的配比,发现最佳处方为每180mg处方粉末含有胃蛋白酶、凝乳酶、淀粉、乳糖、甘露醇、硬脂酸镁的量分别为20mg、56mg、67.1mg、17.1mg、18mg、1.8mg,选用5号胶囊填充处方粉末;最后根据《中国药典》(10版)二部附录I E胶囊剂项下规定对胶囊的干燥失重、装量差异、崩解时限进行检查和评估,发现干燥失重、装量差异和崩解时限均在《中国药典》(10版)的要求范围内。4.论文研究了制备出的复合凝乳酶胶囊对功能性消化不良的治疗效果。首先进行了功能性消化不良大鼠模型的构建,发现论文构建的功能性消化不良大鼠模型的饮食量及体增率较空白组明显减少,而且通过解剖观察发现造模大鼠无明显的器质性疾病,证明实验造模成功;之后,论文评估了我们制备得到的复方凝乳酶、复合凝乳酶(?)和多潘立酮治疗功能性消化不良的效果,模型大鼠的体增率及胃排空率的测定结果显示,复方凝乳酶、复合凝乳酶和多潘立酮均可以提高FD大鼠的食欲,改善其胃肠动力;复方凝乳酶胶囊和已上市的复合凝乳酶胶囊对FD模型大鼠治疗效果相同,但均低于多潘立酮。