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第一部分NLS-RARα蛋白在电转质粒pCMV-HA-NE的NB4中定位的验证目的：验证电转质粒pCMV-HA-NE的NB4细胞中NLS-RARα蛋白的存在并推测其定位。方法：用质粒pCMV-HA-NE电转NB4细胞,分别用RT-PCR和Western blot法在mRNA水平和蛋白水平验证转染成功;提取电转成功的NB4细胞的核蛋白, Western blot法检测细胞核中NLS-RARα蛋白的表达;用FITC-Annexin V/DAPI双染色免疫荧光法和FITC-AnnexinV/PI双染色激光共聚焦法检测电转成功的NB4细胞中NLS-RARα的表达及定位。结果：电转质粒pCMV-HA-NE的NB4细胞成功表达NE基因和NE蛋白,且有NLS-RARα蛋白表达。用细胞免疫荧光法、激光共聚焦法检测出电转NB4细胞中NLS-RARα蛋白的表达并推测其主要定位于胞核。结论：成功用质粒pCMV-HA-NE电转NB4细胞,并用Western blot法、免疫荧光法、激光共聚焦法验证了NLS-RARα蛋白的存在并推测其主要位于胞核。第二部分NLS-RARα蛋白在电转NB4细胞裸鼠皮下移植瘤中定位的研究目的：研究电转质粒pCMV-HA-NE成功的NB4细胞裸鼠皮下移植瘤中NLS-RARα蛋白的存在及定位。方法：将质粒pCMV-HA-NE电转进NB4细胞中，并用Western blot法验证其中NE蛋白的表达；建立电转NB4细胞裸鼠皮下移植瘤模型；提取成瘤细胞核蛋白,Western blot法检测细胞核中NLS-RARα蛋白的表达；FITC-Annexin V/DAPI双染色免疫荧光法、FITC-Annexin V/PI双染色激光共聚焦法、免疫组化法检测成瘤细胞中NLS-RARα蛋白的表达及定位。设立电转质粒pCMV-HA-KZ的NB4细胞、未电转NB4细胞两个对照组。结果:电转成功，Western blot法检测到其中有NE蛋白表达。成功建立电转NB4细胞裸鼠皮下移植瘤模型；成瘤细胞中有NLS-RARα蛋白表达；FITC-Annexin V/DAPI双染色免疫荧光法、FITC-AnnexinV/PI双染色激光共聚焦法、免疫组化法成功检测到其中NLS-RARα蛋白的表达，并推测其中NLS-RARα蛋白的表达主要位于胞核。结论:成功用4种方法检测出成瘤细胞中的NLS-RARα蛋白的存在并推测其主要位于胞核。第三部分NLS-RARα蛋白在APL病人血中性粒细胞中定位的验证目的：验证急性早幼粒细胞白血病(APL)病人血中性粒细胞中NLS-RARα蛋白的存在并定位。方法：用Western blot法验证病人血中性粒细胞的NE酶；提取病人血中性粒细胞核蛋白， Western blot法检测细胞核中NLS-RARα蛋白的表达；FITC-Annexin V/DAPI双染色免疫荧光法检测和FITC-Annexin V/PI双染色激光共聚焦法检测病人血中性粒细胞中NLS-RARα蛋白的表达及定位。以电转质粒pCMV-HA-NE的NB4细胞中NLS-RARα蛋白的表达及定位作阳性对照，以正常人血中性粒细胞中野生型RARα的表达和定位作阴性对照。结果:阳性对照组设置成功。病人血中性粒细胞中存在NE酶且有NLS-RARα蛋白表达。根据细胞免疫荧光法、激光共聚焦法检测结果，推测病人血中性粒细胞中NLS-RARα蛋白的表达主要位于胞核。结论:成功用3种方法检测出APL病人血中性粒细胞中的NLS-RARα蛋白的存在并推测其主要位于胞核。