论文部分内容阅读
目的:1)分析宫颈癌组织中胶原蛋白与HPV感染的相关性;2)探讨COL3A1对宫颈癌细胞增殖、迁移的作用。方法:1)应用DAVID、STRING、KOBAS等数据库,对9种胶原蛋白进行功能注释与富集分析及信号调控网络分析,评价胶原蛋白功能异常与肿瘤发生和发展的关系;2)选取38例宫颈癌和30例非癌宫颈对照组织提取DNA,采用q PCR对各组样本进行HPV分型;3)提取上述组织总RNA,通过q PCR方法,检测宫颈癌组织内9种胶原蛋白转录水平;4)选取宫颈癌和非癌宫颈组织切片各30例,采用免疫组织化学方法检测COL3A1蛋白表达水平;5)常规培养宫颈癌C33A,Siha及Hela细胞,通过q PCR方法检测三种宫颈癌细胞内COL3A1表达水平;6)构建COL3A1过表达质粒载体,并转染Siha细胞建立COL3A1过表达模型;7)CCK8实验检测宫颈癌细胞增殖能力;8)划痕实验检测宫颈癌细胞迁移能力。结果:1)生物信息学结果显示:在胶原蛋白涉及的多种生物学过程和信号通路中,细胞外基质组织,细胞黏附、整联蛋白结合等生物学过程以及黏着斑、人乳头瘤病毒感染和PI3K-AKT信号通路与宫颈癌的发生发展密切相关;2)HPV分型结果:共有41例HPV阳性标本,其中36例为宫颈癌组织,5例对照组组织。HPV感染亚型:单纯HPV16阳性33例,HPV16伴HPV18阳性有3例,HPV16伴HPV33/52/58/67阳性5例;3)q PCR分析结果显示,与对照相比,宫颈癌组织内COL1A2、COL3A1、COL6A1、COL6A3和COL21A1等5种胶原蛋白m RNA水平显著下调(P<0.05);4)免疫组织化学结果显示,宫颈癌组织中COL3A1表达水平显著下调(P<0.05),与q PCR分析结果一致;5)Siha和Hela细胞COL3A1表达水平低于C33A细胞(P<0.05),但Siha与Hela细胞内表达水平无显著差异(P>0.05);6)COL3A1过表达后,Siha细胞增殖能力明显降低(P<0.05);7)COL3A1过表达后,Siha细胞迁移能力受到显著抑制(P<0.05)。结论:1)宫颈癌组织中表达下降的9种胶原蛋白参与多种与肿瘤相关的生物学过程;2)HPV阳性的宫颈癌组织内COL1A2、COL3A1、COL6A1、COL6A3和COL21A1等5种胶原蛋白表达下降;3)COL3A1可抑制宫颈癌Siha细胞的增殖和迁移能力,在宫颈癌的发生发展中起重要作用。