积雪草中活性成分的提取分离

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积雪草是一种传统的中草药,具有多种药理活性,应用前景广泛。但长久以来,积雪草的药理活性成分不明确,特定成分的分离提纯难度大,限制了积雪草的应用。因此,研究积雪草中活性成分的提取分离工艺具有良好的社会、经济和应用价值。目前对积雪草中极性成分的研究多集中于积雪草总苷,它能够有效促进伤口愈合,具有抑菌消炎等活性。积雪草总苷中包含积雪草苷-B、羟基积雪草苷和积雪草苷三种有效成分,三种物质化学结构十分相近,采用常规的分离方法很难实现这三者的完全分离。本文引入一种新的分离技术——模拟移动床色谱SMB,分两步从积雪草总苷中分离出三种活性物质,得到积雪草苷产品的纯度为98.7%,回收率为93.5%;羟基积雪草苷产品的纯度为87.62%,回收率为80.66%;积雪草苷-B产品的纯度为81.77%,回收率为83.67%。对于积雪草中的弱极性成分,目前研究较少,药理实验显示积雪草的弱极性成分具有抗抑郁、抗菌、抗氧化等多种药理活性,越来越受到人们的重视。本文采用超临界CO2萃取技术在60℃、30MPa下提取积雪草中的弱极性成分,提取率约为2%(w/w)。通过测定酸价、皂化值,并进行甲酯化反应,结合GC等分析手段,间接推断出萃取物中含有棕榈酸、硬脂酸、亚油酸等成分。以动物实验测定萃取物的抗抑郁活性,结果显示萃取物具有实验性抗抑郁活性;以DPPH法测定萃取物的抗氧化活性,其IC50为4.985 mg/mL。积雪草的超临界CO2萃取物成分复杂,对其进行色谱分离后进行气质鉴定。以硅胶作为固定相,二氯甲烷作为流动相,进行层析分离,分段收集流出液,浓缩后进行气质鉴定。共鉴定出27种物质,其中含有大量的短链不饱和烯烃类物质和长链脂肪酸、脂肪酸酯等物质。经硅胶柱一次分离后得到一个单一化合物,气质鉴定为邻苯二甲酸二正辛酯。选择抗氧化活性最高的组分1进行硅胶柱二次分离,以正己烷作为流动相,得到第二个单一化合物,气质初步鉴定为(E)-7,11-二甲基-3-亚甲基-1,6,10-十二碳三烯。
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