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目的:探讨“通调针法”电针对MGH大鼠下丘脑TRH、GHRH及其受体mRNA表达的影响。
方法:将36只健康雌性SD大鼠适应性喂养一周后,运用随机数字表法完全随机平均分为3组。B组(模型组)与C组(电针组)大鼠以雌二醇联用黄体酮造模法肌注30日;A组(空白组)以0.9%NaCl溶液肌注30日,进行乳腺增生病模型的制备,造模结束后各组分别选取1只大鼠对乳腺组织在光镜下对比观察,确定造模成功后基础喂养两天进行治疗。对A组与B组大鼠每日进行一次捉拿后固定于大鼠治疗台,与C组相同时间,相同腧穴常规消毒但不予其他处理;C组大鼠用郭老所创的“通调针法”配合电针进行治疗。选穴分为甲组穴(天宗穴、肝俞穴、足三里)、乙组穴(屋翳穴、合谷穴、膻中穴);甲乙两组腧穴轮替操作,除膻中穴外均为双侧,每日一次,每次20分钟。5次为1个治疗周期,停歇2日,行下一治疗周期,共完成4个治疗周期。并于造模成功后当日与治疗完成后第二日于游标卡尺测量各组大鼠第二对乳头高度、直径;对各组大鼠左侧第二对乳房取材,行HE病理染色,光镜下观察组织结构变化;同时运用腹主动脉采血法,将血液离心取血清后使用Elisa检测血清中GHRH、TRH的含量变化,取出大鼠下丘脑组织,用PCR定量检测下丘脑组织TRHmRNA、GHRHmRNA受体表达。
结果:1.乳头直径和高度变化:MGH模型复制前,各组大鼠乳头高度和直径没有明显差异;造模完成后,B、C组大鼠乳头高度、直径均明显增加,各组对比空白A组,均有显著差异(P<0.01),B、C组间对比,均无明显差异(P>0.05);电针治疗结束后,与A组大鼠相比较,B组乳头高度和直径都显著增大(P<0.01);与B组相比,C组乳头高度和直径明显减小(P<0.05)。
2.光镜下乳腺组织形态的改变:治疗结束后,B组大鼠与A组相比,乳腺导管扩张明显且形态不规则,管腔内分泌物明显增多,上皮细胞排列不规则;腺泡数量明显增多且体积变大,小叶肿大明显;与B组相比,C组大鼠在乳腺导管、管腔分泌物、腺泡数量等方面均有明显改善。
3.大鼠血清中TRH、GHRH含量变化:与A组相比,B组血清中TRH、GHRH含量降低,差异显著(P<0.05);与B组相比,C组血清中TRH、GHRH含量上升,差异显著(P<0.01、P<0.05)。
4.下丘脑组织TRHmRNA、GHRHmRNA表达情况:与A组相比,B组下丘脑组织中TRHmRNA、GHRHmRNA表达降低,差异显著(P<0.01);与B组相比,C组下丘脑组织中TRHmRNA、GHRHmRNA表达上升,均有统计学意义(P<0.01)。
结论:1.“通调针法”电针可对MGH大鼠乳腺组织起着良性调节作用。
2.“通调针法”电针治疗乳腺增生病可能通过调节下丘脑的功能,使GHRH、TRH水平增加,使TRHmRNA与GHRHmRNA的表达升高发挥其治疗作用。
方法:将36只健康雌性SD大鼠适应性喂养一周后,运用随机数字表法完全随机平均分为3组。B组(模型组)与C组(电针组)大鼠以雌二醇联用黄体酮造模法肌注30日;A组(空白组)以0.9%NaCl溶液肌注30日,进行乳腺增生病模型的制备,造模结束后各组分别选取1只大鼠对乳腺组织在光镜下对比观察,确定造模成功后基础喂养两天进行治疗。对A组与B组大鼠每日进行一次捉拿后固定于大鼠治疗台,与C组相同时间,相同腧穴常规消毒但不予其他处理;C组大鼠用郭老所创的“通调针法”配合电针进行治疗。选穴分为甲组穴(天宗穴、肝俞穴、足三里)、乙组穴(屋翳穴、合谷穴、膻中穴);甲乙两组腧穴轮替操作,除膻中穴外均为双侧,每日一次,每次20分钟。5次为1个治疗周期,停歇2日,行下一治疗周期,共完成4个治疗周期。并于造模成功后当日与治疗完成后第二日于游标卡尺测量各组大鼠第二对乳头高度、直径;对各组大鼠左侧第二对乳房取材,行HE病理染色,光镜下观察组织结构变化;同时运用腹主动脉采血法,将血液离心取血清后使用Elisa检测血清中GHRH、TRH的含量变化,取出大鼠下丘脑组织,用PCR定量检测下丘脑组织TRHmRNA、GHRHmRNA受体表达。
结果:1.乳头直径和高度变化:MGH模型复制前,各组大鼠乳头高度和直径没有明显差异;造模完成后,B、C组大鼠乳头高度、直径均明显增加,各组对比空白A组,均有显著差异(P<0.01),B、C组间对比,均无明显差异(P>0.05);电针治疗结束后,与A组大鼠相比较,B组乳头高度和直径都显著增大(P<0.01);与B组相比,C组乳头高度和直径明显减小(P<0.05)。
2.光镜下乳腺组织形态的改变:治疗结束后,B组大鼠与A组相比,乳腺导管扩张明显且形态不规则,管腔内分泌物明显增多,上皮细胞排列不规则;腺泡数量明显增多且体积变大,小叶肿大明显;与B组相比,C组大鼠在乳腺导管、管腔分泌物、腺泡数量等方面均有明显改善。
3.大鼠血清中TRH、GHRH含量变化:与A组相比,B组血清中TRH、GHRH含量降低,差异显著(P<0.05);与B组相比,C组血清中TRH、GHRH含量上升,差异显著(P<0.01、P<0.05)。
4.下丘脑组织TRHmRNA、GHRHmRNA表达情况:与A组相比,B组下丘脑组织中TRHmRNA、GHRHmRNA表达降低,差异显著(P<0.01);与B组相比,C组下丘脑组织中TRHmRNA、GHRHmRNA表达上升,均有统计学意义(P<0.01)。
结论:1.“通调针法”电针可对MGH大鼠乳腺组织起着良性调节作用。
2.“通调针法”电针治疗乳腺增生病可能通过调节下丘脑的功能,使GHRH、TRH水平增加,使TRHmRNA与GHRHmRNA的表达升高发挥其治疗作用。