论文部分内容阅读
目的:检测miRNA-182在骨肉瘤HOS细胞中的表达水平,通过构建过表达miRNA-182转染载体检测对骨肉瘤HOS细胞凋亡的影响。
方法:通过RT-qPCR检测骨肉瘤HOS细胞中miR-182的表达水平。构建过表达的miRNA-182的转染载体,进行转染后细胞共培养,通过RT-qPCR检测转染后miRNA-182表达水平,显微镜下观察细胞形态。其次进行Western blot分析,以探索miR-182对RAC1通路蛋白的作用,利用CCK-8法分析过表达的miRNA-182基因对骨肉瘤HOS细胞生长的抑制情况,最后通过流式细胞术评估miR-182对骨肉瘤HOS细胞的细胞周期及凋亡的影响。
结果:miRNA-182在骨肉瘤HOS细胞中呈低表达。构建过表达的miRNA-182转染载体后,骨肉瘤HOS细胞中RAC1通路蛋白及下游PAK1蛋白的表达水平显着下调。miRNA-182的过表达显着促进骨肉瘤细胞的凋亡并阻止其细胞周期S期进程。
结论:MiRNA-182在骨肉瘤中呈低表达。可通过调控RAC1通路蛋白促进骨肉瘤HOS细胞的凋亡并阻止细胞周期进程。
方法:通过RT-qPCR检测骨肉瘤HOS细胞中miR-182的表达水平。构建过表达的miRNA-182的转染载体,进行转染后细胞共培养,通过RT-qPCR检测转染后miRNA-182表达水平,显微镜下观察细胞形态。其次进行Western blot分析,以探索miR-182对RAC1通路蛋白的作用,利用CCK-8法分析过表达的miRNA-182基因对骨肉瘤HOS细胞生长的抑制情况,最后通过流式细胞术评估miR-182对骨肉瘤HOS细胞的细胞周期及凋亡的影响。
结果:miRNA-182在骨肉瘤HOS细胞中呈低表达。构建过表达的miRNA-182转染载体后,骨肉瘤HOS细胞中RAC1通路蛋白及下游PAK1蛋白的表达水平显着下调。miRNA-182的过表达显着促进骨肉瘤细胞的凋亡并阻止其细胞周期S期进程。
结论:MiRNA-182在骨肉瘤中呈低表达。可通过调控RAC1通路蛋白促进骨肉瘤HOS细胞的凋亡并阻止细胞周期进程。