原发性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是常见的恶性肿瘤，而我国80％～90％的HCC患者为乙肝病毒(hepatitis B virus，HBV)感染导致。HCC预后极差，寻找有效的全身治疗方案对改善患者生活质量、延长生存期有积极意义。我们前期的体外及动物试验发现，非细胞毒性抗肿瘤药物——生长抑素类似物(somatostatin analogue，SSTA)及选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)抑制剂，都对肝癌细胞有显著的抗增殖及诱导调亡作用，且二者有良好的协同作用。而当转染入乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein，HBX)后，肝癌细胞生长抑素受体(somatostatin receptor，SSTR)表达降低，SSTA抗瘤效应明显减弱。而近年的临床实验显示，SSTA在HCC患者体内的疗效却存有较大差异，这就有必要进一步探究相关的人体内影响因素。SSTA及COX-2抑制剂抗瘤效应的发挥有赖于肿瘤组织中有SSTR及COX-2的表达。而SSTR及COX-2在HCC患者肿瘤组织中的表达情况却尚不清楚。乙肝后HCC患者体内的HBX是否会影响SSTR表达，进而降低SSTA体内疗效，亦不得而知。探究SSTR各亚型及COX-2在乙肝后肝癌发生发展中的演变规律，阳性表达率及表达量，SSTR与HBX表达的相关性，SSTR与甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)表达的相关性等问题，将有利于解释疗效差异、显效几率及用药时机等药理及临床问题，并为选择适合用药的患者提供有益信息。本研究旨在回答下列问题：1．从正常肝→慢性肝炎→肝硬化→癌前病变→HCC，这一常见肝病病理发展过程中，人体肝组织SSTR1～5亚型表达经历了怎样的演变过程?2．SSTR1～5亚型在乙肝后HCC患者的肿瘤组织中阳性表达率及表达量是多少?3．乙肝后HCC患者肿瘤组织中HBX的表达是否会影响SSTR1～5亚型的表达?4．从肝硬化→癌前病变→HCC的发展过程中，患者肝组织中COX-2表达经历了怎样的演变过程?COX-2与SSTR表达之间是否有相关性?何时为SSTA与选择性COX-2抑制剂单独或联合用药的最佳时期?5．HCC患者血AFP水平与肿瘤组织中SSTR表达之间是否有相关性?血AFP水平能否间接反映肿瘤中SSTR表达水平，进而用于筛选适合SSTA治疗的HCC患者?方法：1．逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)检测各种人肝组织中SSTR1-5亚型mRNA表达。2．DNA侧序法检测人SSTR1～5亚型RT-PCR扩增产物特异性。3．免疫组化(immunohistochemistry,IHC)法检测各种人肝组织中SSTR1～5亚型蛋白表达。4．放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)检测各种人肝组织中SST含量。5．免疫组化法检测各种人肝组织中HBX蛋白表达。6．Western blot法检测各种人肝组织中COX-2蛋白表达。7．酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测HCC患者肿瘤组织及外周血中AFP水平。结果：1．各种人体肝组织中均有SSTR1～5mRNA表达，其阳性率依次为：正常肝组织(5例)20．0～80．0％；慢性肝炎组织(14例)57．1～85．7％；肝硬化组织(40例)60．0～92．5％；癌旁肝组织(40例)90．0～97．5％；肝癌组织(40例)62．5～87．5％。呈正常肝＜慢性肝炎＜肝硬化＜癌旁组织＞肝癌趋势，P＜0．05。2．人SSTR1～5亚型RT-PCR扩增产物经侧序鉴定及基因比对，显示同源性96％～100％，特异性高。3．各种人体肝组织中SSTR1～5蛋白阳性率及表达量(IOD值)依次为：正常肝组织(5例)20．0～60．0％，0．13～0．81；慢性肝炎组织(14例) 42．9～71．4％，1．02～4．41；肝硬化组织(40例)47．5～67．5％，1．93～5．15；癌旁肝组织(40例)85．0～95．0％，23．57～32．56；肝癌组织(40例) 47．5～70．0％，5．93～10．13。呈正常肝＜慢性肝炎＜肝硬化＜＜癌旁肝＞肝癌趋势，P＜0．05。4．SSTR1～5阳性染色见于肝细胞胞膜及胞浆中，在正常肝、慢性肝炎及肝硬化组织中呈“散在无规律”分布；而在癌旁肝组织中，SSTRs表达迅速增强，并呈现“围门脉分布”特征，在单个肝细胞上亦呈现“向门脉侧”表达现象，且离肿瘤区越近越明显。5．正常肝、慢性肝炎及肝硬化组织中血管上SSTRs表达极少；癌旁肝组织中血管上SSTRs表达率明显增加，且离肿瘤区越近越明显，表达部位为门脉系统血管内皮的胞膜上，中央静脉及肝动脉上未见表达。6．各种人体肝组织中，仅在部分有慢性胆管炎的标本中偶见SSTR1、2、4表达于胆管上皮胞膜上，SSTR3、5未见表达。7．肝癌组织中SSTRs表达较癌旁组织明显降低(P＜0．05)，但仍高于肝硬化组织(P＜0．05)。肝癌组织中血管分布极少，亦极少见血管表达SSTRs。肝癌组织中SSTR1～5蛋白阳性率／mRNA阳性率依次为61％、80％、80％、79％、93％，以SSTR5亚型的转录效能最高。8．正常肝组织(5例)、慢性肝炎(14例)、肝硬化(40例)、癌旁肝(40例)及肝癌组织(40例)中SST含量(pg/mg蛋白)依次为：16．2±2．4、78．3±14．1、140．6±30．4、618．1±129．6及352．8±74．4，各组之间有显著差异(P＜0．05)。9．正常肝、慢性肝炎、肝硬化、癌旁肝及肝癌组织中SSTR1～5蛋白表达量(IOD值)与SST含量(pg/mg蛋白)呈直线正相关，γ依次为：0．899、0．907、0．908、0．928、0．919(P＜0．05)。10．肝硬化组织(40例)、癌旁肝组织(40例)及乙肝后肝癌组织(40例)中HBX蛋白阳性表达率及表达量(IOD值)依次为：55．6％，5．75±2．13；91．7％，7．21±3．21；23．1％，7．17±2．79。呈肝硬化＜癌旁≥肝癌趋势，P＜0．05。11．直线相关分析及曲线拟合分析显示，肝硬化、癌旁及乙肝后肝癌组织中HBX表达量与SSTR1～5表达量之间无直线相关性(γ依次为0．382、0．581、0．512、0．174、0．378，P＞0．05)，亦无曲线相关性(γ依次为0．403、0．614、0．569、0．386、0．507，P＞0．05)。12．肝硬化(40例)、癌旁肝(40例)及肝癌组织(40例)中COX-2蛋白表达阳性率及表达量(目的条带OD值／β-actin条带OD值)依次为：95．0％，0．256±0．038；82．5％，O．199±0．032；77．5％，0．138±0．014。呈肝硬化＞癌旁＞肝癌趋势，P＜0．05。13.从肝硬化到癌旁肝组织，SSTR1～5表达与COX-2表达呈直线负相关，r依次为-0.802、-0.897、-0.822、-0.870、-0.885，P＜0.05；从癌旁肝到肝癌组织，SSTR1～5表达与COX-2表达呈直线正关，r依次为0.531 (P＞0.05)、0.789、0.617、0.713、0.735，P＜0.05。14.40例HCC患者中，血AFP阳性29例，阴性11例。相关分析显示，肝癌患者血AFP水平与肿瘤组织中AFP表达量呈显著直线正相关(r=0.938，P＜0.01)，即血AFP水平随肿瘤组织中AFP表达的增加而升高。15.多项式曲线拟合分析显示，人肝癌组织中SSTR1～5表达量与癌组织中AFP表达量在二次曲线时具有最高拟合适度，二者呈二次曲线正相关关系(r依次为0.786、0.901、0.841、0.845、0.904，P<0.05)。肿瘤组织AFP水平过高或过低，都降低了SSTRs表达。16.多项式曲线拟合分析显示，人肝癌组织中SSTR1～5表达量与血AFP　水平在二次曲线时具有最高拟合适度，二者呈二次曲线正相关关系(r依次为0.882、0.901、0.877、0.854、0.903，P＜0.05)。血AFP　水平过高或过低，都伴随着肝癌组织中SSTRs的低水平表达。17.SSTR1～5表达高坪区(50％CI)对应的血AFP水平分别为200～600　ng／ml、300～800 ng／ml、200～600 ng／ml、200～800 ng／ml、200～800ng／ml。一负性增殖调控机制。3.在肝癌癌前病变阶段，SSTRs的峰值表达状态、向门脉表达现象、SST-SSTRs复合物的胞吞和再循环现象突出等均提示，此时90％左右的肝细胞以其最大的努力启动SST-SSTRs这一负性增殖调控机制以调整自身增殖异常。可见SST-SSTRs是机体重要的肿瘤负性调控元件。4.SSTR2、5亚型在癌前病变区的显著上调，不仅可用于临床上鉴别癌前病变与肝硬化，更为SSTA用于抵御癌前病变恶化提供了可能，此时为SSTA治疗的最佳阶段，故对有癌前病变的患者，估计90％左右的患者可从SSTA治疗中获益。5.肝细胞癌变后，变异的细胞基因组削弱了SSTRs这一负性增殖调控力量，降低幅度达10～30％，这更加速了肿瘤恶性增殖。6.在肝癌发生发展过程中SST水平与SSTRs表达量在各阶段呈平行关系，除了提示这些病理状态下上调的SSTRs有充分的配体予以激活外，还说明了与SST产生或代谢有关的肝外因素也协同参与了抑制肝癌发生的过程。7.从直接抑制HCC的角度，约60％的肝癌患者可为SSTA治疗的适宜　者。而40％的HCC组织无SSTRs表达，且进展期肝癌SSTR表达量　明显降低，故SSTA对这部分患者可能无效或微效。这可能正是SSTA　在肝癌患者中呈现不同疗效的重要原因。估计SSTA治疗HCC的有　效率约为60％。8.HBX在肝癌及癌前病变(癌旁)区的高量表达，进一步证实了HBX　与HCC发生发展关系密切。9.在人体内HBX对SSTRs的表达没有明显影响，约60％的乙肝后HCC　患者肿瘤组织中有SSTRs表达，这为SSTA治疗提供了作用基础。10.在肝硬化→癌前病变(癌旁)→肝癌续贯发生过程中，COX-2表达逐渐降低的现象展示了慢性炎症向癌症发展的重要信号，故COX-2抑制剂的抗增殖效应越早期越好。11.癌前病变及HCC早期，为SSTA及选择性COX-2抑制剂协同作用的最佳时机。12.HCC患者外周血AFP水平随肿瘤组织中AFP表达的升高而升高。13.HCC患者肿瘤组织中AFP水平过高或过低，都降低了肿瘤组织　SSTRs表达。14.HCC患者血AFP水平过高或过低，都指示着肝癌组织中SSTRs的低　水平表达，血AFP在200～800ng/ml范围内指示肝癌组织SSTRs呈　高表达，这种患者应是SSTA治疗的恰当候选者。本研究探讨了乙肝后HCC患者肝癌发生发展过程中SSTRs表达的演变规律及其相关因素，不仅从一个新的视角了解了HCC发展的生物学规律，也为SSTA用于肝癌治疗提供了新的策略调整思路。