氟喹诺酮类药物是一类化学合成的抗菌药，该类药物具有抗菌谱广，抗菌力强，作用迅速，吸收完全，且毒作用小等特点，因此该类药物广泛应用于人医及兽医临床。但是，随着此类药物的广泛应用，其在动物源性食品中的残留对人类身体健康产生了非常大的危害，引起了广泛的关注。本研究旨在建立一种多残留免疫分析方法对动物源性食品中氟喹诺酮类药物的残留进行检测。　　 本研究对环丙沙星(CIP)和沙拉沙星(SAR)进行了分子改造，在它们分子结构中的哌嗪环上连接一个游离的氨基，合成四种新型半抗原(CIP1、CIP2、SAR1、SAR2)。然后，采用戊二醛法将合成的半抗原分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OA)连接，制备四种免疫原和四种包被原，半抗原与载体蛋白的结合比范围在12-17∶1之间。以四种免疫原分别免疫Balb/c小鼠，利用间接ELISA方法评价不同的包被抗原与抗体组合，经过多次试验，表明环丙沙星的两种免疫原具有较好的免疫特性。选择血清效价最高且有明显抑制作用的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞。通过间接竞争ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞，采用有限稀释法经过多次筛选得到两株阳性杂交瘤细胞株。采用小鼠体内诱生法产生腹水，以饱和硫铵法进行纯化，得到单克隆抗体。所得抗体能同时识别环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、沙拉沙星、二氟沙星、达氟沙星、氧氟沙星、马波沙星、培氟沙星、洛美沙星、氨氟沙星和依诺沙星等12种氟喹诺酮类药物。以该抗体为基础，建立起一种检测12种氟喹诺酮类药物的ELISA方法。该法对上述药物的交叉反应率范围为23％-120％，IC50范围为7.6-39.5ng/mL，最低检测限(IC10)范围为1.0-4.5ng/mL。然后，选取8种兽用喹诺酮类药物分别在空白鸡肉中按照50、100ng/g的浓度添加，ELISA方法检测，添加回收率范围为61.5％-82.5％，变异系数为7.5％-15.2％。　　 因此，本方法可以作为一种快速筛选工具用于动物源性食品中氟喹诺类药物的多残留检测，以提高检测效率，保障动物性食品安全。