【摘 要】
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目的:阐明Skp2和CBX7在宫颈癌组织和细胞中的表达水平及作用,探讨Skp2和CBX7在宫颈癌中是否存在相互调控作用。方法:通过慢病毒及质粒载体转染的方法分别升高和降低宫颈癌细胞中Skp2和CBX7的表达量,用WB和RT-PCR实验检测蛋白质和m RNA表达水平;用MTT、克隆形成、创伤愈合、Transwell侵袭、流式细胞术等实验检测宫颈癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭以及凋亡的变化;生物信息
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（项目编号:81760468）,探索 CBX7 抑制宫颈癌恶性发展的分子机制研究；
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目的:阐明Skp2和CBX7在宫颈癌组织和细胞中的表达水平及作用,探讨Skp2和CBX7在宫颈癌中是否存在相互调控作用。方法:通过慢病毒及质粒载体转染的方法分别升高和降低宫颈癌细胞中Skp2和CBX7的表达量,用WB和RT-PCR实验检测蛋白质和m RNA表达水平;用MTT、克隆形成、创伤愈合、Transwell侵袭、流式细胞术等实验检测宫颈癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭以及凋亡的变化;生物信息数据库挖掘来探索Skp2和CBX7在宫颈癌组织中的表达水平和表达意义,预测Skp2和CBX7的相互作用;通过基因营救实验研究CBX7对Skp2功能的调控作用。结果:（1）Skp2在宫颈癌组织中表达水平高于癌旁正常组织（P＜0.05）;（2）过表达Skp2的宫颈癌He La和Si Ha细胞增殖率、克隆形成数、细胞侵袭数、迁移率等大于空载体组,而凋亡率小于空载体组（P＜0.05）;敲低Skp2表达的宫颈癌细胞增殖率、克隆形成数、细胞侵袭数、迁移率等小于空载体组,而凋亡率大于空载体组（P＜0.05）;（3）过表达Skp2降低了CBX7蛋白表达量,敲低Skp2表达升高了CBX7蛋白表达量;（4）Skp2和CBX7存在相互作用关系,并且CBX7可以作为Skp2的泛素化底物;（5）CBX7在宫颈癌组织中表达降低,CBX7低表达的宫颈癌患者总生存期小于CBX7高表达患者（P＜0.05,HR=0.43,95%CI（0.26,0.69））;（6）CBX7可以逆转Skp2对宫颈癌细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移以及凋亡的影响。结论:在宫颈癌组织中Skp2表达升高、CBX7表达降低,Skp2可能通过泛素化降解CBX7发挥促癌作用,CBX7可以逆转Skp2在宫颈癌中的促癌作用,从而发挥抑制肿瘤的作用。
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