【摘 要】
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本课题主要研究了大黄提取物抑菌活性成份的最佳提取工艺条件,探讨了大黄提取物稳定性并对活性成份进行初步的分析、分离,同时对抑菌机理做了初步研究。采用滤纸片法,以抑菌
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本课题主要研究了大黄提取物抑菌活性成份的最佳提取工艺条件,探讨了大黄提取物稳定性并对活性成份进行初步的分析、分离,同时对抑菌机理做了初步研究。采用滤纸片法,以抑菌圈直径为评价标准,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为指示菌,优化超声波辅助提取大黄抑菌物质的工艺。通过正交试验得出最佳提取工艺条件为:提取温度60℃,乙醇体积分数70 %,超声波处理时间35min、液料比20 : 1(mL:g)。对大黄提取物做了抗菌谱的测定,结果表明大黄提取物具有较宽的抗菌谱。大黄提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为6.250mg/mL、3.125 mg/mL、6.250mg/mL。对大黄提取物进行抑菌效果稳定性测试,结果表明大黄提取物的抑菌活性具有较好的热稳定性、对紫外光照射稳定,随着加热时间的延长到3h,抑菌活性在这段时间内较稳定,pH值6.5-7.5范围内抑菌效果稳定。对抑菌活性成份进一步分析,用四种不同极性的溶剂对大黄提取物水溶液进行萃取,得到五个萃取部分:石油醚部、二氯甲烷部、乙酸乙酯部、正丁醇部和水部。采用滤纸片法,测定大黄提取物不同萃取部分的抑菌活性,并对抑菌活性进行比较,结果表明:二氯甲烷部抑菌活性最强。通过碱性试验、醋酸镁试验、紫外可见光下显色,初步确定二氯甲烷部主要活性成份为蒽醌类化合物。二氯甲烷部分经硅胶柱层析后得到黄色物质,经过LC-MS分析,确定此黄色物质为大黄素。对大黄提取物的抑菌机理做了初步研究,试验表明大黄提取物可以抑制细胞内苹果酸脱氢酶酶的活性,表明抑制酶活性是大黄抑制或杀死菌体的原因之一。
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