目的:净固片来源于经典古方“净固丸”,史载于《儒门事亲》,其主要组方为槐花、枳壳,其作为经典药对历来是抗痔疮类中药的核心主药,如槐角丸等,所含主要成分芦丁和柚皮苷,具备显著的抗炎和抗微循环作用。芦丁和柚皮苷亦是化学药“强力痔根断、爱脉朗”主要活性成分。本论文以槐花和枳壳中的芦丁和柚皮苷等主要活性成分为指标,对净固片的制备工艺和质量标准进行了研究。方法:净固片制备工艺的研究:本章对净固片组方中生药进行了水提、醇沉和干燥得到净固片提取物,并对工艺参数进行了考察,然后对净固片的片剂工艺中辅料和包衣进行了考察,最后分别对各工艺进行了中试研究。1、以总黄酮含量为指标,采用正交试验设计分别对水提工艺中加水量、提取时间、提取次数和粉碎度等因素进行优化和醇沉工艺中生药提取后的浓缩液浓度、乙醇浓度和静置时间等因素进行优化。然后以样品含水量及总黄酮含量为评价指标,对干燥工艺中干燥温度和干燥时间因素进行考察;2、采用粉末直接压片法,以粉末的流动性和可压性、素片的崩解时限、硬度和脆碎度为主要考察指标,分别对辅料种类、辅料配比、崩解剂的种类和用量进行了组方筛选,并对素片的薄膜包衣的包衣液配方、包衣方案和包衣增重进行了考察和研究。净固片质量标准的研究:采用薄层色谱法、紫外可见分光光度法和HPLC法分别对净固片的质量进行定性和定量分析。1、薄层色谱法定性鉴别,用硅胶G薄层板,以乙酸乙酯-甲酸-水(8:1:1)为展开剂,以三氯化铝试液为显色剂,紫外光灯365nm下检视;2、紫外可见分光光度法定量分析,以芦丁为对照品,在波长257 nm处对样品中的总黄酮进行含量测定;3、HPLC法定量分析净固片中芦丁、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷及槲皮素五个活性成分的含量,HPLC色谱条件:依利特Kromasil-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5?m),流动相0.2%冰醋酸-乙腈(B)梯度洗脱(0~10min,12%~15%B;10~15 min,15%~17%B;15~25 min,17%B;25~35 min,17%~20%B;35~45 min,20%~22%B;45~60 min,22%~40%B),柱温30℃,进样量10?L,流速1.0 m L/min,芦丁和槲皮素检测波长为254 nm,柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷检测波长为283 nm。结果:净固片制备工艺研究表明:1、“净固片提取物”制备工艺:取枳壳(粗颗粒)生药及槐花(炒)生药,以12倍量水溶液,常压加热回流提取3次,每次2小时,合并三次提取液,将合并的提取液浓缩,浓缩液体积为原生药的2倍(体积与重量比:m L/g),加适量乙醇,使乙醇浓度达到70%,静置过夜,收集上清液,减压(55~60℃,0.09~0.10 MPa,浓缩比重约1.25 g/cm3),60℃减压真空干燥12 h(真空度0.09~0.10MPa,含水量2.31%,总黄酮含量28.90%)。中试研究结果与小试研究数据基本吻合,主要工艺流程各项参数重复性良好。2、制剂工艺:原辅料分别过80目筛备用,将净固片提取物、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮、硬脂酸镁和微粉硅胶按50.0:16.6:30.0:2.0:0.7:0.7的比例充分混合均匀,直接粉末压片得素片;然后配制16%的欧巴代包衣溶液,并将素片在烘箱中预热至约40~50℃,再将包衣锅内的片床温度升至70℃左右,开启喷枪,在初始包衣过程中,包衣锅转速在0.8~4 r/min,喷枪流速需控制在2~6 m L/min,至片芯包上一层薄薄的衣膜后,再逐步加快包衣锅转速和喷枪的流速,控制包衣锅转速在5~13 r/min,喷枪流速为7~15 m L/min;至片芯增重2.86%停止包衣;将包衣后的片子置于50℃烘箱中固化1 h,得合格薄膜包衣片。中试放大生产过程中生产顺利、重现性好,各项质量指标考察合格。净固片的质量标准研究结果显示:1、净固片薄层色谱鉴别结果表明供试品色谱中,在对照药材或对照品色谱相应的位置上,芦丁和柚皮苷斑点清晰,且阴性对照在相应位置无干扰;2、紫外-可见分光光度法测定结果表明净固片的总黄酮在4.89?g/m L~24.44?g/m L有良好的线性关系(r=0.9999),该法的平均加样回收率为97.37%,RSD为0.22%,净固片中总黄酮的含量为39.00 mg/片;3、HPLC测定结果表明芦丁在0.0125~0.5004 mg/m L(r=1.0000),柚皮苷在0.0100~0.4008 mg/m L(r=0.9999),橙皮苷在0.0033~0.0327 mg/m L(r=0.9992),新橙皮苷在0.0113~0.2256 mg/m L(r=0.9999),槲皮素在0.0041~0.0813 mg/m L(r=0.9998)与峰面积具有良好的线性关系,平均回收率均在98%~102%,净固片中芦丁、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷及槲皮素的含量分别为9.40 mg/片、4.67 mg/片、0.41 mg/片、3.81 mg/片、0.92 mg/片。结论:1、“净固片提取物”制备工艺简单方便,稳定可靠;2、优选的制剂工艺制备的成品片剂脆碎度、硬度均符合要求,表明工艺组方设计合理,工艺稳定;3、薄层鉴别法鉴别净固片中芦丁和柚皮苷重现性良好、专属性强,可作为净固片的鉴别方法;4、紫外-可见分光光度和HPLC含量测定方法,操作简便,结果准确可靠,可行性及重复性良好,可作为净固片的质量控制方法。本论文完成了净固片的制备工艺和质量标准,为其新药的开发和申报打下坚实的基础。