血管疾病是危及人类健康的常见疾病之一,其主要的治疗手段是血管移植术。因此血管移植物的来源就成为人们关注的重要课题。目前临床上应用的血管移植物主要有自体血管、异体血管和人工材料三种来源,但不能满足临床需求。因为自体血管来源有限,异体血管容易产生免疫排异反应,人工材料不适合作为小口径血管移植物,远期通畅率低。 组织工程学的兴起为血管移植物的来源提供了一条崭新的思路。血管组织工程是利用血管壁的正常细胞和生物可降解材料来制备、重建和再生血管替代材料的一门科学,使在体外培植具有生物活性,结构、功能与自体血管相类似的人工血管成为可能。 本实验采用大鼠血管内皮细胞和平滑肌细胞作为种子细胞的来源,明胶—壳聚糖和生物蛋白胶作为支架材料,进行了组织工程血管的体外构建和体内移植的实验研究。目的是探索血管组织工程的可行性途径。本课题分为如下三部分: 第一部分 血管组织工程种子细胞的培养和鉴定 目的:为血管组织工程的实验研究提供种子细胞。方法:全麻下取大鼠的主动脉,分别采用酶消化法和组织块贴壁法获取血管内皮细胞和平滑肌细胞,并进行两种细胞的传代、纯化、免疫组化鉴定以及形态学观察。 结果:培养的两种细胞符合血管内皮细胞和平滑肌细胞的形态特征,免疫组化鉴定内皮细胞Ⅷ因子(+),平滑肌细胞α-肌动蛋白(+)。结论:所培养的血管内皮细胞和平滑肌细胞为血管组织工程提供了细胞来源。