【摘 要】
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肿瘤标志物(CA125)是检测卵巢癌的“黄金标准”。因此,具备电极工艺简单、成本低廉、灵敏度和选择性高等诸多优势的CA125免疫传感器,在卵巢癌的筛查和诊断等临床应用中具有重要意义。本文制备出一种基于金-垂直石墨烯(Au-VG)/TiO2的电极,用于构建无标记电化学免疫传感器。可在氧化还原双路径中,对血清中CA125进行微量检测。该传感体系中,Au-VG/TiO2电极用作信号放大平台,胞嘧啶(Cy
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肿瘤标志物(CA125)是检测卵巢癌的“黄金标准”。因此,具备电极工艺简单、成本低廉、灵敏度和选择性高等诸多优势的CA125免疫传感器,在卵巢癌的筛查和诊断等临床应用中具有重要意义。本文制备出一种基于金-垂直石墨烯(Au-VG)/TiO2的电极,用于构建无标记电化学免疫传感器。可在氧化还原双路径中,对血清中CA125进行微量检测。该传感体系中,Au-VG/TiO2电极用作信号放大平台,胞嘧啶(Cyt)用作氧化路径的探针,多巴胺(DA)用作还原路径中的探针。首先,以TiO2纳米管阵列为基底,借助化学气相沉积技术使VG纳米片合成。之后利用电沉积技术,使得金纳米粒子深埋在VG纳米片的表面和根部,以制备Au-VG/TiO2电极。由于金纳米粒子与垂直石墨烯的吸附作用结合,改善了工作电极的比表面积、导电性和生物相容性。此外,CA125抗体对金纳米颗粒具有天然亲和力,因此直接将其固定在电极表面。其次,研究了构建可靠性高的免疫传感器的最佳实验条件及定量检测方法。通过对探针浓度、抗体浓度、抗体孵育时间和抗原孵育时间优化,获得了CA125定量检测模型的最优参数。在氧化和还原路径中,CA125抗体对于Au-VG/TiO2免疫电极测定CA125抗原具有相同的响应浓度范围(0.1~1000 mU·mL-1)。对于这两种研究路径,我们发现氧化路径不仅灵敏度高,而且检测限(0.0001mU·mL-1)低于还原路径的检测限(0.0026 mU·mL-1)。我们还对免疫传感器进行性能测试,包括再生性、重现性、特异性以及长期稳定性等。实验结果表明,与还原路径相比,氧化路径拥有更出色的稳定性和更低的性能偏差。最后,我们将该免疫传感器已成功用于人血清中CA125的检测。
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