【摘 要】
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淋球菌特异性感染人类引起性传播疾病淋病,缺乏有效的治疗可引起严重的并发症。目前治疗淋病的临床一线疗法是头孢曲松单一疗法或头孢曲松联合阿奇霉素双重疗法,然而淋球菌对这些药物耐药性的逐年上升严重威胁未来淋病的治疗,已引起全球持续关注。本研究旨在监测淋球菌抗生素耐药性的分子流行病学以及耐药机制,为淋球菌耐药性的传播和影响以及抗菌药物管理提供实验依据。从中国杭州七家医院收集到2015年至2017年的淋球菌
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淋球菌特异性感染人类引起性传播疾病淋病,缺乏有效的治疗可引起严重的并发症。目前治疗淋病的临床一线疗法是头孢曲松单一疗法或头孢曲松联合阿奇霉素双重疗法,然而淋球菌对这些药物耐药性的逐年上升严重威胁未来淋病的治疗,已引起全球持续关注。本研究旨在监测淋球菌抗生素耐药性的分子流行病学以及耐药机制,为淋球菌耐药性的传播和影响以及抗菌药物管理提供实验依据。从中国杭州七家医院收集到2015年至2017年的淋球菌临床分离株379株,采用琼脂稀释法分析药敏性,利用淋球菌多抗原序列分析（Neisseria gonorrhoeae multiple antigen sequence,NG-MAST）确定序列类型并进行菌株亲缘关系分析,通过PCR和测序确定抗性决定因子。总计17%的分离株对头孢曲松显示出敏感性降低,包含35株（6%）对头孢曲松耐药的分离株,并且针对头孢曲松的耐药性从2015年的2%（3/127）增至2017年的5%（5/107）;总计20%对阿奇霉素耐药,55株（10%）是阿奇霉素高耐药菌株。在2019年,从杭州一家医院收集到70株淋球菌临床菌株,21株（30%）分离株对头孢曲松耐药,10%分离株显示高水平的头孢曲松耐药性,且都含有pen A 60.001等位基因,通过全基因组测序表征为新兴的淋球菌FC428克隆相关菌株。本研究发现blaTEM-135等位基因在杭州地区的产青霉素酶的淋球菌（Penicillinase-producing Neisseria gonorrhoeae,PPNG）分离株中丰度很高,并且普遍存在于亚洲型质粒中。琼脂稀释法测定青霉素最低抑制浓度结果显示亚洲型质粒/blaTEM-135的PPNG分离株对青霉素的最低抑菌浓度远高于其它菌株,通过荧光定量PCR(检测质粒拷贝数和blaTEM基因表达)、蛋白质印迹分析（检测TEM蛋白含量和TEM蛋白稳定性）和体内β-内酰胺酶活性分析研究了代表性分离株以阐明产生差异的原因,结果显示亚洲型质粒/blaTEM-135的分离株具有最高的β-内酰胺酶活性,这与亚洲型质粒较非洲型质粒具有更高的blaTEM基因表达量以及TEM-135较TEM-1具有更高的蛋白稳定性有关。总之,本研究表明淋球菌对头孢曲松的敏感性正在迅速下降,耐药率的逐年上升以及多重耐药菌株的出现对目前的头孢曲松单药治疗以及在杭州和中国其他地区可能实施的头孢曲松联合阿奇霉素的双重疗法构成了重大威胁。
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