研究目的:本实验通过构建G蛋白信号调节蛋白2(G-p roteinsignaingmodulator2,GPSM2)稳定高表达的胰腺癌细胞株,研究GPSM2与人胰腺癌细胞迁移能力的关系。探讨以GPSM2作分子靶点,为胰腺癌的治疗提供新思路和新策略。研究方法:1、构建GPSM2基因过表达质粒,并转染人胰腺癌MIA-PaCa-2细胞株。2、采用RT-PCR技术检测GPSM2基因转染组、未转染组(空白对照组)和空载体p C M V-Tag3B转染组(阴性对照组)中GPSM2基因m R N A的表达水平。3、Western-blot检测各组胰腺癌细胞GPSM2、β-连环蛋白(β-catenin)的表达。4、采用Transwell实验检测各组胰腺癌细胞迁移能力变化。研究结果:1、成功构建了GPSM2稳定高表达的重组细胞株。2、RT-PCR结果显示GPSM2基因转染组的m R N A表达量较阴性对照组及空白对照组明显增加(均P<0.0 1),与空白对照组相比,GPSM2基因上调效率达到了7 3.3倍。阴性对照组与空白对照组间GPSM2mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.0 5)3、Western-blot结果证实GPSM2基因重组细胞株中GPSM2蛋白、β-catenin蛋白均高表达(均P<0.0 5)。阴性对照组与空白对照组间GPSM2蛋白及β-catenin蛋白表达水平差异无统计学意义(均P>0.0 5)。采用一元线性回归分析得出胰腺癌细胞中GPSM2与β-catenin的表达水平呈正比(P<0.0 5)。4、Transwel实验发现GPSM2稳定高表达的胰腺癌细胞株的迁移细胞计数明显高于阴性对照组及空白对照组(均P<0.0 1)。结论:GPSM2稳定高表达的胰腺癌细胞株的迁移细胞计数明显增加,在人胰腺癌细胞中上调GPSM2的表达能使β-catenin蛋白高表达,可能由此促进人胰腺癌细胞的迁移能力。