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目的:以明日叶(Angelica keiskei)为研究对象,通过对明日叶采用性状、显微、光谱法和色谱法进行鉴别,建立明日叶的鉴别方法;对明日叶的相关检查项目进行了研究,分别对其水分、浸出物和农药残留进行了检测;采用HPLC同时测定明日叶中绿原酸和木犀草苷含量,建立其含量测定方法;采用HPLC建立不同产地明日叶的指纹图谱,并基于UPLC-Q-Exactive高分辨质谱联用技术对其化学成分进行了研究,为建立明日叶的质量控制方法和进一步开发利用提供科学依据。方法:1.性状鉴别法;采用石蜡切片法和粉末制片观察明日叶叶的显微特征;用明日叶作为对照药材,对明日叶的叶进行薄层色谱法鉴别;采用紫外-可见光谱法测定用冷浸法、超声提取法和回流法制备的样品溶液的零阶、一阶、二阶导数光谱;采用红外光谱法测定10批不同产地的明日叶的红外光谱,并应用Omic软件对数据进行处理,建立其红外光谱鉴别法;2.按照《中国药典》方法分别测定明日叶水分、浸出物,农药残留检测采用气相色谱法(GC),分别测定了明日叶药材六六六、滴滴涕、五硝基苯的含量;3.使用HPLC测定指标性成分含量,进行明日叶成分的含量测定,比较不同产地明日叶中绿原酸和木犀草苷含量;4.通过对色谱条件进行摸索,采用HPLC建立明日叶药材的HPLC指纹图谱,并进行了精密度试验、重复性试验、稳定性试验的方法学考察,分别采用相似度分析、聚类分析及主成分分析对明日叶HPLC指纹图谱进行分析;5.采用UPLC-Q Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨液质联用技术分析明日叶提取物的化学成分,为建立明日叶质量控制方法和进一步开发利用提供实验基础。结果:1.通过性状鉴别、显微鉴别的方法较为系统的描述了明日叶叶的性状特征及显微特征,其中油室的分布、不等式气孔、网纹导管等可作为明日叶叶的鉴别特征;薄层色谱法结果显示明日叶叶的斑点清晰,在与对照药材相同位置上具有相同颜色的斑点,阴性无干扰;明日叶叶的提取液在紫外-可见光谱中显示一定的特征;建立了明日叶红外特征指纹图谱共有模式,标定了9个共有峰;2.通过对明日叶相关检查项目的研究,初步拟定明日叶的水分含量不得超过7.79%,醇溶性浸出物含量不得少于17.1%。GC法测定明日叶药材六六六、滴滴涕、五硝基苯的含量,在≦0.05mg/kg的残留量限量下均未测出,表明10批明日叶农药残留含量符合规定,并进行方法学考察,符合农残留分析的要求,最低检出浓度均低于低于相关限量要求;3.HPLC测定明日叶绿原酸和木犀草苷的含量,各峰分离度良好,线性关系良好,回归方程分别为Y=2.06×10~7X+81325(r=0.9992),木犀草苷为Y=1.99×10~7X-35021(r=0.9996),绿原酸和木犀草苷的平均回收率为99.68%和98.55%,绿原酸和木犀草苷重复性试验的RSD%分别为2.89%、2.23%,精密度试验、重复性试验、稳定性试验,符合《中国药典》要求,操作简便、稳定、可靠,分析效率高,可为明日叶质量控制提供科学依据。4.建立了明日叶HPLC指纹图谱,共标出14个共有峰,进行方法学考察,明日叶的共有峰相对保留时间、相对峰面积、精密度试验、重复性试验、稳定性试验,符合指纹图谱分析要求。采用相似度分析分析明日叶指纹图谱,相似度均在0.9以上;聚类分析结果显示10批明日叶聚类为3类,S1~S5为一类,S6~S9为一类,S10为一类;主成分分析数据结果表明有两个主成分,主成分平面的得分图实验结果与聚类分析较为一致;5.采用UPLC-Q-Exactive高分辨质谱联用技术,通过质谱核对,数据库匹配,查阅文献,从明日叶醇提物中初步推测了8个化合物,分别为:蝉翼素(pteryxin,1),木犀草素-7-鼠李糖葡萄糖苷(luteolin-7-rhamno-glucoside,2),丝立尼亭(Selinidin,3),4-羟基德里辛(4-hydr-oxyderricin,4),槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷(quercetin-3-O-glucuronide,5),黄色当归醇(xanthoangelol,6),豆甾醇(tigmasterol,7),胡萝卜苷(Daucosterol,8)。(1)、(3)、为香豆素类化合物,(4)、(6)为查尔酮类化合物,(2)、(5)为类黄酮化合物,(7)、(8)为甾醇体化合物。结论:建立了明日叶性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别、紫外光谱鉴别、红外光谱鉴别;建立了水分、醇浸出物、农药残留限量的检测方法。采用高效液相色谱法,建立10批不同产地明日叶中2种成分含量测定,该方法准确、稳定,重复性好,可用于不同产地明日叶的质量控制;建立的明日叶HPLC指纹图谱方法,共标定14个共有峰,分别采用相似度评价、聚类分析、主成分分析法分析明日叶的指纹图谱,所建立的HPLC指纹图谱方法稳定可靠,省时高效,重复性好,可用于明日叶质量控制。采用UPLC-Q Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨液质联用技术初步分析了明日叶乙醇提取物中可能含有的化学成分,为明日叶化学成分的研究奠定了基础,对明日叶的开发利用具有一定的指导意义。