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本实验建立了大孔吸附树脂色谱分离、高速逆流色谱(HSCCC)和制备型高效液相色谱相结合的现代分离纯化方法,采用这些方法对环孢菌素进行分离纯化,从中分离出两个未报道的由茄病镰刀菌产生的环孢菌素同系物。
应用电喷雾电离多级质谱法(ESI-MS)分析总结了环孢菌素类化合物的裂解规律,采用强酸水解后电喷雾电离多级质谱直接分析的方法对构成环孢菌素的氨基酸特别是1位上的特殊氨基酸进行了定性分析,从而建立了简捷有效的初步判断环孢菌素类化合物化学结构的方法。采用上述方法并结合其它结构分析手段,对两个未报道的由茄病镰刀菌产生的环孢菌素同系物进行化学结构研究,证明其中一个为已报道的环孢菌素L,另一个同系物的分子量为1184.1,不同于已报道的天然环孢菌素类化合物,初步判断为脱水的环孢菌素A或环孢菌素H,其确切的化学结构正在研究中。
对上述两个环孢菌素同系物进行了抗真菌和免疫抑制活性等生物活性检测,并对实验结果进行了分析探讨。