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目的1临床研究部分旨在通过观察药线灸结合电针疗法对非痴呆型血管性认知障碍患者认知功能的影响,为药线灸治疗本病提供科学的临床和实践依据。2通过建立慢性脑缺血大鼠模型,运用组织病理学、分子生物学等多种现代实验技术,探索药线灸对慢性脑缺血大鼠海马CA1区神经元细胞的影响,为临床药线灸治疗本病提供实验依据。方法1 将符合纳入标准的75例非痴呆型血管认知障碍患者根据自身意愿分为药线灸结合电针组、电针组、对照组,每组各25例。75例患者均予神经内科的基础治疗,此外药线灸结合电针组给予电针及药线灸治疗,依据临床辨证分析,制定针灸穴位处方,主穴：百会、四神聪、神庭、双侧风池、内关、足三里、三阴交。根据辨证配穴：肾虚髓减证加悬钟；心肝阴虚证加太冲；心脾两虚证加阴陵泉；痰浊阻窍证加丰隆；气滞血瘀证加血海。电针组给予电针治疗,取穴同药线灸结合电针组。隔日治疗1次,每周3次,休息1天,共治疗8周。在治疗前、治疗8周结束时用蒙特利尔认知功能评估量表(MoCA)、简易智力状态检查量表(MMSE)评价干预方法对患者神经心理学的影响。2将40只雄性清洁级Wistar大鼠随机分组：正常组7只,假手术组7只,余下26只建立慢性脑缺血动物模型。术后1周剩余模型动物14只,随机分为模型组、药线灸组。术后2周对药线灸组进行药线灸治疗,观察周期为4周,药线灸治疗每日1次,连续治疗6天休息1天,共24次。治疗结束后,HE染色观察大鼠海马CA1区神经元细胞的变化,免疫组化法检测海马CA1区细胞凋亡相关指标Bax、Bcl-2和C-fos的变化,依靠图像分析技术对蛋白表达做半定量分析。结果1本试验纳入患者75例,最终完成试验64例。研究结果发现：(1)治疗8周后,药线灸结合电针组与电针组的MoCA评分与对照组相比均有显著提高,且差异具有统计学意义(P<0.01),同时,药线灸结合电针组与电针组相比,MoCA分值提高,差异显著(P<0.01)。电针药线灸疗法与电针疗法均可以改善患者的认知能力,从而起到治疗血管性认知障碍的作用。在改善整体认知功能方面,药线灸结合电针组优于电针组。药线灸结合电针组的记忆力、注意力得分高于电针组(P<0.05)。改善视空间与执行功能、抽象思维能力方面,药线灸结合电针组和电针组无统计学差异(P>0.05)。(2) MMSE量表评分分值在治疗后出现变化,或提升,或下降,但经统计学分析,这些差异并未造成统计学意义上的组间差异(P>0.05)。但两两组间比较分析时发现,对于治疗前后MMSE总分差值,药线灸结合电针组与对照组相比有差异,此差异具有统计学意义(P<0.05),说明药线灸结合电针组可在一定程度上提高血管性痴呆患者MMSE分值,与单纯提供基础治疗的对照组相比较,认知功能还是有所改善。(3)治疗8周后,药线灸结合电针组显效2例,有效4例,改善症状11例,无效3例,总有效率85%；电针组显效0,有效0,改善症状14例,无效7例,总有效率66.67%；对照组显效0,有效0,改善6例,无效17例,总有效率26%。三组总有效率相比较有极显著的统计学差异(P<0.01)。将试验结果做意向性治疗分析的“最差情况演示分析(worst-case scenario analysis)",分析总有效率。结果：药线灸结合电针组、电针组与对照组总有效率组间差异显著,有统计学意义(P=0.035<0.05)。2造模后6周,海马区的神经元细胞坏死明显,而药线灸组的大鼠神经元细胞坏死的程度较轻。说明在慢性脑缺血的内环境下,大鼠海马神经元受损,药线灸疗法可以减轻慢性脑缺血对海马神经元细胞的破坏作用,从而减轻神经元细胞的损伤。在慢性脑缺血大鼠的海马区,模型组有明显的bax和c-fos的阳性表达,药线灸组大鼠药线灸治疗后,海马区的C-fos、Bax表达数量较模型组减少,且这一差异具有统计学意义(P<0.01),说明药线灸治疗可以下调C-fos、Bax因子表达,抑制促凋亡因子的释放,从而保护神经元细胞。正常组大鼠海马区内,Bcl-2大量表达,而模型组Bcl-2水平较正常组降低(P<0.05)。药线灸组大鼠经治疗后,海马Bcl-2的表达显著增加,比模型组多(P<0.05),与假手术组光密度值相当(P=0.975>0.05)。说明药线灸可以上调Bcl-2水平,抑制细胞凋亡,保护神经元细胞。结论1 药线灸结合电针疗法、电针疗法可改善和提高非痴呆型血管性认知障碍患者的整体认知能力。药线灸结合电针疗法对改善患者的记忆力、注意力优于电针疗法。改善视空间与执行功能、抽象思维能力方面,药线灸结合电针疗法和电针疗法效用相当。药线灸结合电针、电针疗法治疗VCI安全有效,值得临床推广。2采用2-VO方法制备慢性脑缺血大鼠模型,6周后大鼠海马CA1区神经元细胞出现坏死。药线灸疗法可以减轻海马区神经细胞坏死,可抑制海马CA1区神经元细胞凋亡,具有神经保护作用,通过下调C-fos和Bax,上调Bcl-2,维持Bax/Bcl-2相对平衡。细胞凋亡相关通路可能是其作用的机制之一。