【摘 要】
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黑老虎（Kadsura coccinea）是一种常绿木质藤本植物,五味子科,南五味子属。其根是瑶族、壮族和侗族的常用中药。近年来,黑老虎果实作为一种特色水果在我国南方各地区大量栽培,为保证果实质量,生产过程中需要大量摘除多余花朵。黑老虎花为肉质花,厚厚的花瓣中含有丰富的、类似芦荟的胶状物。本文以黑老虎花为材料,首先研究其主要化学成分类型,建立活性成分提取工艺,然后对黑老虎花提取物的急性毒性及抗过敏
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黑老虎（Kadsura coccinea）是一种常绿木质藤本植物,五味子科,南五味子属。其根是瑶族、壮族和侗族的常用中药。近年来,黑老虎果实作为一种特色水果在我国南方各地区大量栽培,为保证果实质量,生产过程中需要大量摘除多余花朵。黑老虎花为肉质花,厚厚的花瓣中含有丰富的、类似芦荟的胶状物。本文以黑老虎花为材料,首先研究其主要化学成分类型,建立活性成分提取工艺,然后对黑老虎花提取物的急性毒性及抗过敏、抗氧化和美白等功效进行研究,探讨其作为化妆品原料使用的可行性。主要研究内容及结果如下:（1）黑老虎花中主要化学成分类型确定:利用化学检识方法进行,多糖、多酚、黄酮、三萜的反应程度较明显;氨基酸、有机酸、生物碱、蒽醌、脂肪的反应较微弱。（2）黑老虎花中各主要化学成分含量测定:采用紫外分光光度法进行,其中多糖为13.83%、多酚1.85%、黄酮1.08%、三萜5.81%、木脂素11.27%。（3）黑老虎花提取物（提取物1）制备方法研究:以黑老虎花提取物1对DPPH·自由基的清除率和对酪氨酸酶的抑制率为指标综合考察,选择水为提取溶剂,并采用正交试验法,优化提取制备条件为:固液比1:70,提取时间50min,温度为50℃为最佳制备条件;提取物得率平均为12.41%。（4）黑老虎花酶辅助提取物（提取物2）制备方法研究:以酶辅助提取液浊度为指标,通过单因素实验确定较佳提取工艺为:黑老虎花粉末0.5g加入100m L蒸馏水、纤维素酶1.25mg,调p H7.0,摇瓶转速160rp/min,提取温度50℃,提取时间42h;在此工艺条件下酶辅助提取物得率为18.73%。（5）黑老虎花两种提取物的含量测定:黑老虎花提取物和酶辅助提取物中多糖含量分别为48.02%和55.66%;多酚含量分别为5.99%和8.05%;黄酮含量分别为1.53%和1.66%;三萜含量分别为6.78%和8.10%;木脂素含量分别为29.29%和25.61%;酶辅助提取物中主要化学成分含量相比提取物有一定增加,酶辅助提取工艺能提高主要成分的提取效果。（6）采用最大剂量法对黑老虎花提取物和酶辅助提取物进行皮肤急性毒性试验和经口急性毒性试验:结果显示,皮肤急性毒性试验最高给药剂量5001mg/kg和经口急性毒性试验最高给药剂量2180mg/Kg条件下,两种提取物对实验鼠均未见明显异常,表明无强毒性和致死性,对皮肤也无强刺激作用。（7）采用化学方法测定两种提取物抗过敏功效:结果显示黑老虎花提取物和酶辅助提取物对透明质酸酶的IC50分别为10.59mg/m L和7.32mg/m L,表明两种提取物均具有一定的抗过敏功效。（8）采用化学法和细胞模型法测定两种提取物抗衰老功效:结果显示黑老虎花提取物和酶辅助提取物对DPPH·自由基的IC50分别为0.13mg/m L和0.11mg/m L;两种提取物都能降低细胞ROS产生,增强H2O2损伤后HSF细胞的自由基清除能力,使细胞中MDA、SOD和CAT活力恢复正常水平,减轻细胞所受的过氧化损伤抵抗衰老,且同等浓度下黑老虎花酶辅助提取物的抗衰老功效更强。（9）采用化学法和细胞模型法测定两种提取物美白功效:结果显示黑老虎花提取物和酶辅助提取物对酪氨酸酶的IC50分别为0.76mg/m L和0.61mg/m L;两种提取物对B16F10细胞均没有毒性,且酶辅助提取物对细胞中酪氨酸酶活性的抑制作用更强,美白效果更显著。
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