新型真菌隐秘抗菌化合物的研究

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大兴安岭有丰富的森林凋落物和冻土资源。为研究这两种材料中可培养真菌的次生代谢物,首先对凋落物和冻土中的真菌进行分离、培养、分子鉴定;然后选择具有新颖性的真菌进行多种方式发酵、提取物制备与抗菌活性筛选;最后对活性菌株的次生代谢物进行分离与鉴定。具体研究内容和结果如下:
  通过贫瘠培养基颗粒法对凋落物和冻土样品进行真菌的分离,一共得到155株真菌,其中凋落物真菌89株,共61个分类单元,冻土真菌66株,共51个分类单元。选择其中25株内部转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)序列具有新颖性(相似性≤97%)的真菌进行抗菌活性测定。
  选用4种不同培养基和添加表观遗传试剂的方法进行了小量发酵,试图寻找隐秘的次生代谢物。利用双层平板打孔药剂扩散法对25株真菌的不同发酵物的提取物进行了7种测试菌的抗菌活性筛选,得到13株活性菌株。其中SGSF196号菌株(Hirsutella属)与SGSF207号菌株(Neocucurb itaria属)抗菌活性较好。
  通过各种层析技术和手段对SGSF196号菌株和SGSFS207号菌株的次生代谢物进行单体化合物的分离与鉴定,其中SGSF196号菌株分离得到6个化合物,鉴定出4个,分别是(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(196A)、N-2-羟基-3E-octadecenoyl-1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-9-甲基-4E,8E-sphingadiene(196C)、3β,5α,9α-三羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-6酮(196D)和2-(4-(4"-羟基-2"-甲氧基-3",5",6"三甲基苄氧基)-2-羟基-3,5,6-三甲基苄氧基)-6-甲氧基-3,4,5-三甲基苯甲酸(196F),其中化合物196F为新化合物。SGSF207号菌株分离得到3个化合物,鉴定出1个,为1,3-2-羟基-5-十五烷基苯(207C)。
  本研究在大兴安岭样品中,分离培养了多株具有抗活性的真菌,分析了2株真菌的次生代谢物,获得并鉴定了5个已知单体化合物(含1个新结构化合物),为后续的大兴安岭真菌资源的利用奠定了基础。
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