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鸡白介素18(Chicken interleukin-18, ChIL-18)是2000年发现的一种细胞因子，它具有广泛的生物学活性，除能够促进γ-干扰素（IFN-γ）的产生，刺激淋巴细胞转化，增强NK细胞的杀伤活性，还在介导细胞免疫、抵抗微生物感染方面具有重要的作用。毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一，该系统操控简单、经济，表达量高，具有翻译后修饰的能力。目前已有多种外源蛋白在毕赤酵母表达系统中得到成功表达。因此可用毕赤酵母表达获得高产量且具有生物活性的鸡白介素18成熟蛋白(mature Chicken interleukin-18, mChIL-18)。本试验我们对表达重组鸡白介素18（mChIL-18）的毕赤酵母工程菌株GS115/pPIC9K-mChIL-18进行中试发酵表达，优化各种发酵条件以提高表达产量。然后将mChIL-18制备成脂质体制剂以提高其生物利用度，测定其对新城疫疫苗的免疫增强作用,为mChIL-18的研究与开发打下基础。本研究的主要结果如下：复苏工程菌GS115/pPIC9K-mChIL-18于YPD培养基，在其OD600达到5.2左右时转入发酵罐中，采用分批补料方式对毕赤酵母工程菌进行高密度发酵。控制和优化各种发酵条件，经历84h结束发酵。将发酵液离心，用6×His镍柱对上清中的表达产物进行纯化。经优化表达条件，证明在pH5.5，溶氧值20%-30%，温度28℃，诱导72h，mChIL-18的表达产量为560mg/L，发酵上清经纯化后纯度可达70%以上。用逆向蒸发法制备半胱胺脂质体将mChIL-18与胆固醇和磷酸卵磷脂按照一定的比例减压蒸馏制成，包封率为25.4%。同时，针对IL-18具有免疫治疗及免疫增强作用这一功能，将SPF鸡随机分成4组，I组为单纯疫苗组；II组为联合免疫组，每组注射0.2mL mChIL-18脂质体；III组为空载体免疫组；IV组为空白对照组，只注射生理盐水。7日龄首免，从体液免疫和细胞免疫水平上分析试验结果。结果表明，mChIL-18脂质体与疫苗联合接种试验鸡所产生的HI抗体在接种14d后一直高于单纯疫苗免疫组，且在接种后第14、21和28天时差异显著(P<0.05)；同时，流氏细胞术检测试验鸡CD4~+和CD8~+T细胞增殖试验表明，接种mChIL-18脂质体的试验鸡CD4~+和CD8~+T细胞增殖反应均强于单纯疫苗免疫组。其中，CD4~+和CD8~+T细胞都呈上升趋势，但一免的7d后呈下降趋势，在二免后又呈上升趋势且持续时间比较长，在各阶段与其它组差异显著（P<0.05）；攻毒试验表明，在免疫后第28天时应用新城疫强毒F48E9攻击，单纯疫苗免疫组的保护率仅为66.7%，而同时注射mChIL-18脂质体组的保护率为86.7%，明显高于单纯疫苗免疫组。因此，IL-18作为免疫增强佐剂有利于提高机体免疫力，提高疫苗的免疫效力，较好地提高机体抵抗力，为以后在生产实践中的应用打下良好的基础。