论文部分内容阅读
目的:本项研究通过给BalB/c小鼠注射大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体(MWReg30)制备ITP动物模型,用齐顺保利尔进行干预研究,观察ITP模型小鼠外周血血小板、骨髓巨核细胞数,脾脏指数,血小板相关抗体PAIg G及血小板表面单克隆抗体CD41/CD61等进行研究,从动物水平上探讨齐顺保利尔治疗ITP作用机理。方法:给予大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体(MWReg 30单抗)造模,每日注射2μg大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体(MWReg 30单抗)(PBS配制,2μg/200μl)于BALB/c小鼠腹腔,连续注射7 d,在注射后0、24、72、120和168 h,取小鼠尾静脉血,检测血小板数量,当血小板水平下降到正常(造模前)水平的一半以下时,视为建模成功。按血小板计数将90只小鼠随机分为6组,正常对照组、模型组、齐顺保利尔低剂量组、齐顺保利尔中剂量组、齐顺保利尔低高量组、阳性对照组。每组15只。正常对照组和模型组于造模前7天分别按0.2ml/10g体重分别给予生理盐水灌胃,每日1次,共灌胃7天。齐顺保利尔低剂量组(0.4g/kg)、中剂量组(1.2g/kg)、高剂量组(2.0g/kg)等三组分别给予不同浓度的药物悬液,阳性对照组给予血康胶囊(1.2g/kg)浓度的药物悬液,每日1次,共灌胃7天后小鼠腹腔注射CD41单克隆抗体1周。实验结束后通过观察小鼠一般状态及血小板计数、骨髓巨核细胞数量、脾脏及胸腺指数、血小板相关抗体PAIg G、血小板表面特异性抗体CD41/CD61等指标进行研究,从而探讨齐顺保利尔治疗ITP的药物机理。结果:1.ITP小鼠模型的建立:研究表明,通过小鼠腹腔内注射大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体(MWReg30)能够诱导血小板减少,模型组小鼠血小板数在注射后72小时降到原血小板数的40%左右,表明ITP小鼠模型建立基本成功。实验结果:1.各组小鼠外观行为观察:正常组小鼠的精神、行动以及反应良好,皮毛有光泽,饮食正常;模型组小鼠精神状态欠佳,活动减少伴扎堆,毛色暗乱,饮食有减少;齐顺保利尔组和对照组小鼠精神状态良好,饮食无明显变化,皮毛较光泽,活动正常。各组小鼠一般状态比较,无明显差异。2.各组小鼠体重比较,无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。3.各组小鼠血小板数量对比:与正常对照组比较,模型组小鼠外周血血小板明显减少,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,齐顺保利尔各组血小板明显升高,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。4.与模型组比较,齐顺保利尔组小鼠骨髓巨核细胞数量明显增加,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。5.各组小鼠脏器指数观察:与正常组小鼠比较,模型组小鼠脾脏指数明显大于正常组,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,齐顺保利尔组小鼠脾脏指数明显降低,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。各组小鼠胸腺指数无明显差异(P>0.05)。6.各组小鼠血小板相关抗体PAIg G:与正常组小鼠比较,模型组血小板相关抗体PAIg G明显升高,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,齐顺保利尔组血小板相关抗体PAIg G显著降低(P<0.05)。7.各组小鼠血小板表面特异性抗体CD41/CD61表达情况:与模型组比较,齐顺保利尔组血小板表面特异性抗体CD41/CD61表达显著升高,有统计学意义(P<0.05)。结论:1.本次研究通过注射大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体(MWReg30)制备ITP动物模型的方法基本成功,但此方法在短时间内对小鼠一般状态,体征及胸腺没有产生明显影响。2.蒙药齐顺保利尔可能通过降低血小板相关抗体,时小鼠外周血小板增多,减低脏器指数,从而改善免疫系统功能。3.蒙药齐顺保利尔可能通过促进产板巨核细胞分化成熟,调控血小板表面特异性抗体CD41/CD61的表达,促进血小板生产,从而达到治疗ITP的效果。