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[目的]本研究通过建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤(Renal ischemia-reperfusion injury,RIRI)模型,探讨重组人促红细胞生成素(Recombineant human erythropoietih,rhEPO)和褪黑素(Melatonin,Mel)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用,并对其可能机制进行初步研究。[方法]健康雄性SD(Sprague-dawly)大鼠共32只,随机分成4组,每组8只,分别为:(1)假手术组(Sham组):麻醉后以腹正中线为切口,逐层开腹,将部分肠管移出体外,游离两侧肾脏,分离左右两侧肾蒂,并不结扎,暴露切口 45分钟后缝合切口;(2)缺血再灌注组(IR组):麻醉后以腹正中线为切口,逐层开腹,将部分肠管移出体外,游离两侧肾脏,分离左右两侧肾蒂,用无创动脉夹夹闭两侧肾蒂45分钟造成肾缺血(肾脏由鲜红色变成暗红色),45分钟后松开无创动脉夹实行再灌注,松开动脉夹5分钟内肉眼观测肾脏颜色变化,若肾灌注后颜色由暗红色转为鲜红色,表示灌注成功,然后逐层缝合切口;(3)促红细胞生成素组(EPO组):在术前24小时给予重组人促红细胞生成素(rhEPO)(3000u/kg)腹腔注射预处理,注射24小时后建立大鼠缺血再灌注模型,手术方式参照IR组;(4)褪黑素组(Mel组):在术前24小时给予褪黑素(Melatonin,Mel)(20mg/kg)腹腔注射预处理,注射24小时后建立大鼠缺血再灌注模型,手术方式参照IR组。假手术组和缺血再灌注组分别在术前24小时给予等量生理盐水(0.7ml/kg)腹腔注射。各组大鼠在肾脏恢复血液灌注24小时后处死,同时留取血清和肾组织标本。测定各组大鼠血清肌酐(serum creatinine Values,Scr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);将各组肾脏标本进行苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色,观察其病理学改变;免疫组化分析法测定血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1),观察其在肾脏组织中的表达情况。[结果]肾功能结果分析:与Sham组比较,IR组血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与IR组比较,EPO组和Mel组血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与EPO组相比较、Mel组血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。肾脏组织形态学结果分析:Sham组大鼠肾脏组织结构基本完整,未见明显异常。与Sham组大鼠肾脏组织相比,IR组肾脏组织出现明显的形态学改变,可见肾小管上皮细胞及肾小球毛细血管内皮细胞明显肿胀、部分甚至坏死,大量管型形成,肾间质充血、水肿、大量炎症细胞浸润。与IR组大鼠肾脏组织相比,EPO组和Mel组肾脏组织可见少量炎症细胞浸润,组织损伤程度明显减轻。血红素加氧酶-1(HO-1)在肾脏表达情况结果分析:在Sham组仅见少量HO-1表达,与Sham组相比较,IR组肾脏HO-1表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与IR组相比较,EPO组和Mel组肾脏HO-1表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与EPO组相比较,Mel组的肾脏HO-1表达无明显差异,差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]1.大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型制备成功,肾脏缺血再灌注损伤可导致血清肌酐及尿素氮升高,引起肾功能损伤,HO-1在肾脏的表达增加。2.rhEPO预处理能显著减轻肾功能损害程度,在病理上明显减轻肾脏损伤。3.Mel预处理能显著减轻肾功能损害程度,在病理上明显减轻肾脏损伤。4.rhEPO和Mel可以增加HO-1的表达,我们可以推测rhEPO和Mel通过诱导HO-1在肾脏的表达减轻氧化应激反应,起到对肾脏IRI的保护作用。5.rhEPO和Mel对肾脏IRI的保护程度基本相同。