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目的探讨促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cell,BMSCs)生物学特性的影响,以及EPO预处理的MSCs修复TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞纤维化作用的影响。方法利用C57BL/6雄性4周龄小鼠通过全骨髓法分离培养扩增纯化小鼠间充质干细胞,培养至第三代的MSC(P3-MSC)采用流式细胞仪检测细胞表面标记的表达(CD45、CD105)及成脂成骨诱导分化的鉴定。P3-MSC与一定浓度的rhEPO共培养24h后,行细胞表面标记检测及成脂成骨诱导分化。P3-MSC分别与不同浓度(0、1、10、100、500IU/ml)rhEPO培养48h后,采用CCK-8方法检测细胞增殖情况。采用Transwell体外迁移体系将P3-MSC分别与(0、1、10、100、500IU/ml)rhEPO培养8h后,观察不同浓度的EPO对MSCs迁移的影响。分组:(1)HK-2 组;(2)HK-2+TGF-β1(6ng/ml)组;(3)HK-2+TGF-β1(6ng/ml)+MSCs(105cells/200ul)组;(4)HK-2+TGF-β1(6ng/ml)+EPO 预处理的MSCs(105cells/200ul)组。细胞同步化后,根据不同分组加入TGF-β1、MSCs、EPO预处理24h的MSCs后,经48h后行形态学观察,并收集细胞检测平滑肌肌动蛋白-α(a-SMA)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)mRNA及蛋白的表达水平。结果1.稳定培养的BMSCs呈纺锤形,胞体丰满,胞核较大,呈漩涡分布,流式检测高表达CD105,低表达CD45,具备成脂成骨诱导分化潜能。2.MSCs经EPO(100IU/ml)预处理24h后,MSCs仍高表达CD105,低表达CD45,表面标记未见明显变化,且仍具备成脂成骨诱导分化潜能。3.0、1、10、100、500IU/ml rhEPO 组的吸光度值(OD450)分别为0.230±0.030,0.301±0.012,0.343±0.038,0.348±0.029,0.306±0.027,提示一定浓度范围内的EPO促进MSCs的增殖,以浓度为100IU/ml的作用最明显(P<0.05),浓度为500IU/ml时,MSCs的增殖受到一定程度抑制。4.不同浓度的EPO(0、1、10、100、500IU/ml)干预8h后,染色后高倍镜下观察MSCs的迁移细胞数分别为 18.67±3.06,22.20±3.56,26.00±2.55,34.80±5.80,33.40±3.44,提示EPO对MSCs迁移的影响呈浓度依赖性,EPO在100 IU/ml时MSCs迁移细胞数达到峰值且较对照组具有显著差异(P<0.01)。5.经TGF-β1诱导HK-2细胞的a-SMAmRNA及蛋白表达较对照组显著增加(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.05),普通MSC及EPO预处理的MSC组较TGF-β1诱导HK-2细胞组具显著性差异(P<0.05),且EPO预处理的MSCs组较普通的MSCs组的a-SMA相对表达量进一步减少,E-cadherin相对表达量进一步增多。结论适宜浓度的EPO能促进MSCs的增殖及迁移,并保持MSCs干性。促红细胞生成素增强骨髓间充质干细胞对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞纤维化的修复作用。