功能性脂质分析方法的研究

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功能性脂质是一类具备特殊营养和生理功能的脂质,多不饱和脂肪酸(PUFA)和结构脂是功能性脂质的重要组成部分。目前,1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)结构脂作为营养强化剂扩大到婴儿配方食品、较大婴儿和幼儿配方食品的应用。同时,藻油DHA天然油脂,也是孕妇和婴幼儿群体DHA的补充来源,所以建立针对OPO结构脂和富含DHA天然油脂的检测方法是油脂检测的研究需求。本论文建立针对OPO结构脂和富含DHA油脂的检测方法,具体研究内容如下:建立了针对1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)的技术指标项的系统检测分析方法。GC-FID分析方法检测技术指标项“2位棕榈酸占所有棕榈酸的比例(%)≥52”。HPLC-ELSD分析方法检测技术指标项“1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的含量(%)≥40”和“棕榈酸甘油三酯的含量(%)<10”。HPLC-ELSD分析方法分析OPO结构脂,以CN=52的甘油三酯作为OPO结构脂的1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)的含量,最终检测结果达到65.60%,棕榈酸甘油三酯的含量(%)=3.81%,符合技术指标要求。首次对添加OPO结构脂的婴幼儿配方奶粉的脂肪酸及其脂肪酸在甘油骨架sn-1,2,3的位置分布进行详细研究分析。三个标注添加了OPO结构脂的高端配方奶粉样品A,B,C中有大于40%的棕榈酸P分布在sn-2位,74%-88%的油酸0分布在Sn-1,3位,检测结果与标签数据一致。建立了GC-MS分析方法定性定量检测藻油的脂肪酸组分,特征脂肪酸是C14:0,C16:0,DHA和DPA。确定了六种藻油样品的藻种,A是肯氏壶藻(Ulkenia sp.),B,C,D,E和F是裂壶藻(Schizochytrium sp.)。本论文首次建立了UPLC-Q-Tof-MS/MS快速直接进样定量定性分析藻油样品的TAGS以及sn-1,2,3的位置分布。首次定量定性分析了六种藻油样品的19种TAGS,DHA+DPA的相对含量和位置分布基本一致,结合两个DHA+DPA的甘油三酯是37-52%,结合三个DHA+DPA的甘油三酯是13-19%,结合一个DHA+DPA的甘油三酯是16-29%。sn-2位的DHA+DPA是13-19%,sn-2位的DHA+DPA占总DHA+DPA的48-58%。利用脂肪酶Lipozyme RM IM醇解反应预处理藻油样品,控制醇解反应的进程,使得DHA+DPA以DHA+DPA的DAGs, TAGs和乙酯的形式存在,最后采用溶剂结晶醇解反应溶液达到富集DHA目的,最终产品是DHA+DPA甘油三酯和甘油二酯的混合物。
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