骨骼肌是人体中重要的组成部分,发挥着重要的代谢调控功能,当肌肉发生病变会严重影响人们的正常生活。肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种神经退行性肌肉疾病,目前没有特别好的治疗方法。VAPB是存在于内质网上的一种Ⅱ型整合膜蛋白,在脂质转移和磷脂代谢、膜运输、微管重组、未折叠蛋白质应答以及端粒沉默等细胞功能当中发挥着重要的功能。近几年在一些家族性ALS病人当中鉴定出几种VAPB的点突变体,但是对这些突变体在肌肉分化当中的机制研究还没有报道。本论文基于本实验室前期对VAPB的研究基础,对这些与ALS相关的VAPB点突变体在成肌细胞分化中的机制进行了初步研究。Rab5是一种小GTP酶,定位于早期内体,胰岛素受体底物蛋白IRS1在IGF1-AKT信号通路中起着重要作用。实验室前期研究发现VAPB既可以和Rab5相互作用,又可以和IRS1相互作用,VAPB与Rab5的相互作用增加了IRS1的稳定性,通过影响IGF1-AKT信号通路影响成肌细胞分化(本实验室未发表数据)。本论文研究发现与ALS相关的VAPB点突变体在C2C12成肌细胞中存在聚集,这种聚集的形成改变了内质网的正常结构,这些突变体不能与Rab5结合,与IRS1的共定位消失,不能增加IRS1的稳定性。在C2C12细胞中过表达野生型VAPB可以促进成肌细胞分化,而与ALS相关的VAPB点突变体则不能促进。本研究首次将目前报道的与ALS相关的VAPB点突变体综合到一起,发现它们跟野生型VAPB在促进成肌细胞分化当中的差别,有助于更好地理解VAPB突变在ALS中的致病机理。